انکوائری بی جی

ایڈیس ایجپٹی (Diptera: Culicidae) کے خلاف لاروا اور بالغ علاج کے طور پر پودوں کے ضروری تیلوں پر مبنی ٹیرپین مرکبات کا مجموعہ

Nature.com پر جانے کا شکریہ۔براؤزر کا جو ورژن آپ استعمال کر رہے ہیں وہ محدود CSS سپورٹ رکھتا ہے۔بہترین نتائج کے لیے، ہم تجویز کرتے ہیں کہ آپ اپنے براؤزر کا نیا ورژن استعمال کریں (یا انٹرنیٹ ایکسپلورر میں مطابقت موڈ کو غیر فعال کریں)۔اس دوران، جاری تعاون کو یقینی بنانے کے لیے، ہم سائٹ کو اسٹائل یا جاوا اسکرپٹ کے بغیر دکھا رہے ہیں۔
پودوں سے ماخوذ کیڑے مار مرکبات کے امتزاج کیڑوں کے خلاف ہم آہنگی یا مخالفانہ تعاملات کو ظاہر کر سکتے ہیں۔ایڈیس مچھروں کے ذریعے پھیلنے والی بیماریوں کے تیزی سے پھیلاؤ اور روایتی کیڑے مار ادویات کے خلاف ایڈیس مچھر کی آبادی کی بڑھتی ہوئی مزاحمت کو دیکھتے ہوئے، پودوں کے ضروری تیلوں پر مبنی ٹیرپین مرکبات کے اٹھائیس مرکبات تیار کیے گئے اور ایڈیس ایجپٹی کے لاروا اور بالغ مراحل کے خلاف ٹیسٹ کیے گئے۔پانچ پودوں کے ضروری تیلوں (EOs) کا ابتدائی طور پر ان کی لاروا کشی اور بالغوں کے استعمال کی افادیت کا جائزہ لیا گیا، اور GC-MS کے نتائج کی بنیاد پر ہر EO میں دو بڑے مرکبات کی نشاندہی کی گئی۔اہم شناخت شدہ مرکبات خریدے گئے تھے، یعنی ڈائلائل ڈسلفائیڈ، ڈائیل ٹرائیسلفائیڈ، کارون، لیمونین، یوجینول، میتھائل یوجینول، یوکلپٹول، یوڈیسمول اور مچھر الفا پنین۔اس کے بعد ان مرکبات کے ثنائی امتزاج کو ذیلی خوراکوں کا استعمال کرتے ہوئے تیار کیا گیا اور ان کے ہم آہنگی اور مخالف اثرات کو جانچا اور طے کیا گیا۔بہترین لاروا کش مرکبات لیمونین کو ڈائیل ڈسلفائیڈ کے ساتھ ملا کر حاصل کیے جاتے ہیں، اور بہترین بالغانہ مرکبات کارون کو لیمونین کے ساتھ ملا کر حاصل کیے جاتے ہیں۔تجارتی طور پر استعمال ہونے والی مصنوعی لاروا کش Temphos اور بالغ دوا ملاتھیون کا الگ الگ اور terpenoids کے ساتھ بائنری امتزاج میں تجربہ کیا گیا۔نتائج سے معلوم ہوا کہ temephos اور diallyl disulfide اور Malathion اور eudesmol کا مجموعہ سب سے زیادہ موثر تھا۔یہ طاقتور امتزاج ایڈیس ایجپٹی کے خلاف استعمال کی صلاحیت رکھتے ہیں۔
پودوں کے ضروری تیل (EOs) ثانوی میٹابولائٹس ہیں جن میں مختلف بایو ایکٹیو مرکبات ہوتے ہیں اور مصنوعی کیڑے مار ادویات کے متبادل کے طور پر تیزی سے اہم ہوتے جا رہے ہیں۔یہ نہ صرف ماحول دوست اور صارف دوست ہیں، بلکہ یہ مختلف بایو ایکٹیو مرکبات کا مرکب بھی ہیں، جو منشیات کے خلاف مزاحمت پیدا کرنے کے امکانات کو بھی کم کرتے ہیں۔GC-MS ٹیکنالوجی کا استعمال کرتے ہوئے، محققین نے مختلف پودوں کے ضروری تیلوں کے اجزاء کا جائزہ لیا اور 17,500 خوشبودار پودوں سے 3,000 سے زیادہ مرکبات کی نشاندہی کی، جن میں سے زیادہ تر کیڑے مار خصوصیات کے لیے ٹیسٹ کیے گئے اور رپورٹ کیا گیا ہے کہ کیڑے مار اثرات 3,4 ہیں۔کچھ مطالعات اس بات پر روشنی ڈالتے ہیں کہ کمپاؤنڈ کے بنیادی جزو کی زہریلا اس کے خام ایتھیلین آکسائڈ کے برابر یا اس سے زیادہ ہے۔لیکن انفرادی مرکبات کا استعمال دوبارہ مزاحمت کی نشوونما کے لیے جگہ چھوڑ سکتا ہے، جیسا کہ کیمیائی کیڑے مار ادویات 5,6 کا معاملہ ہے۔لہذا، موجودہ توجہ کیڑے مار دوا کی تاثیر کو بہتر بنانے اور ہدف کیڑوں کی آبادی میں مزاحمت کے امکانات کو کم کرنے کے لیے ایتھیلین آکسائیڈ پر مبنی مرکبات کی تیاری پر ہے۔EOs میں موجود انفرادی فعال مرکبات EO کی مجموعی سرگرمی کی عکاسی کرنے والے امتزاج میں ہم آہنگی یا مخالفانہ اثرات کا مظاہرہ کر سکتے ہیں، یہ ایک حقیقت ہے جس پر پچھلے محققین 7,8 کے ذریعے کیے گئے مطالعات میں اچھی طرح سے زور دیا گیا ہے۔ویکٹر کنٹرول پروگرام میں EO اور اس کے اجزاء بھی شامل ہیں۔Culex اور Anopheles مچھروں پر ضروری تیلوں کی مچھر مار سرگرمی کا بڑے پیمانے پر مطالعہ کیا گیا ہے۔متعدد مطالعات میں مجموعی طور پر زہریلے پن کو بڑھانے اور ضمنی اثرات کو کم کرنے کے لیے مختلف پودوں کو تجارتی طور پر استعمال ہونے والے مصنوعی کیڑے مار ادویات کے ساتھ ملا کر موثر کیڑے مار ادویات تیار کرنے کی کوشش کی گئی ہے۔لیکن ایڈیس ایجپٹی کے خلاف اس طرح کے مرکبات کا مطالعہ نایاب ہے۔طبی سائنس میں ترقی اور ادویات اور ویکسین کی ترقی نے بعض ویکٹر سے پیدا ہونے والی بیماریوں سے لڑنے میں مدد کی ہے۔لیکن وائرس کی مختلف سیرو ٹائپس کی موجودگی، جو ایڈیس ایجپٹائی مچھر کے ذریعے پھیلتی ہے، ویکسینیشن پروگراموں کی ناکامی کا باعث بنی ہے۔لہذا، جب ایسی بیماریاں واقع ہوتی ہیں، تو ویکٹر کنٹرول پروگرام ہی بیماری کے پھیلاؤ کو روکنے کا واحد آپشن ہوتے ہیں۔موجودہ حالات میں ایڈیس ایجپٹائی پر قابو پانا بہت ضروری ہے کیونکہ یہ مختلف وائرسز اور ان کی سیرو ٹائپس کا ایک اہم ویکٹر ہے جو ڈینگی بخار، زیکا، ڈینگی ہیمرجک فیور، زرد بخار وغیرہ کا باعث بنتا ہے۔ تقریباً تمام ویکٹر سے پیدا ہونے والی ایڈز سے پیدا ہونے والی بیماریوں کے کیسز مصر میں ہر سال بڑھ رہے ہیں اور پوری دنیا میں بڑھ رہے ہیں۔لہٰذا، اس تناظر میں، ایڈز ایجپٹی آبادی کے لیے ماحول دوست اور موثر کنٹرول کے اقدامات تیار کرنے کی اشد ضرورت ہے۔اس سلسلے میں ممکنہ امیدوار EOs، ان کے اجزاء کے مرکبات اور ان کے امتزاج ہیں۔لہٰذا، اس مطالعے نے ایڈیس ایجپٹی کے خلاف پانچ پودوں کے کیڑے مار خصوصیات (یعنی پودینہ، مقدس تلسی، یوکلپٹس اسپاٹڈ، ایلیم سلفر اور میلیلیوکا) کے کلیدی پودوں کے EO مرکبات کے موثر ہم آہنگی کے امتزاج کی نشاندہی کرنے کی کوشش کی۔
تمام منتخب EOs نے 0.42 سے 163.65 ppm تک 24-h LC50 کے ساتھ ایڈیس ایجپٹی کے خلاف ممکنہ لاروا کش سرگرمی کا مظاہرہ کیا۔سب سے زیادہ لاروا کش سرگرمی پیپرمنٹ (Mp) EO کے لیے 24 گھنٹے پر 0.42 پی پی ایم کی LC50 ویلیو کے ساتھ ریکارڈ کی گئی، اس کے بعد 24 گھنٹے (ٹیبل 1) پر 16.19 پی پی ایم کی LC50 ویلیو کے ساتھ لہسن (As)۔
Ocimum Sainttum، Os EO کو چھوڑ کر، دیگر تمام چار اسکرین شدہ EOs نے 24 گھنٹے کی نمائش کی مدت کے دوران LC50 کی قدریں 23.37 سے 120.16 ppm کے ساتھ واضح الرجک اثرات دکھائے۔Thymophilus striata (Cl) EO نمائش کے 24 گھنٹوں کے اندر 23.37 ppm کی LC50 ویلیو کے ساتھ بالغوں کو مارنے میں سب سے زیادہ مؤثر تھا، اس کے بعد یوکلپٹس میکولاٹا (Em) جس کی LC50 ویلیو 101.91 ppm (ٹیبل 1) تھی۔دوسری طرف، Os کے لیے LC50 کی قدر کا ابھی تک تعین نہیں کیا گیا ہے کیونکہ سب سے زیادہ خوراک پر شرح اموات 53% ریکارڈ کی گئی تھی (ضمنی شکل 3)۔
ہر EO میں دو بڑے جزو مرکبات کی شناخت اور ان کا انتخاب NIST لائبریری ڈیٹا بیس کے نتائج، GC کرومیٹوگرام ایریا فیصد، اور MS سپیکٹرا کے نتائج (ٹیبل 2) کی بنیاد پر کیا گیا تھا۔EO As کے لیے، شناخت کیے گئے اہم مرکبات ڈائلائل ڈسلفائیڈ اور ڈائلائل ٹرائی سلفائیڈ تھے۔EO Mp کے لیے شناخت کیے گئے اہم مرکبات کارون اور لیمونین تھے، EO Em کے لیے شناخت کیے گئے اہم مرکبات eudesmol اور eucalyptol تھے۔EO Os کے لیے، شناخت کیے گئے اہم مرکبات eugenol اور methyl eugenol تھے، اور EO Cl کے لیے، شناخت کیے گئے اہم مرکبات eugenol اور α-pinene تھے (شکل 1، ضمنی اعداد و شمار 5–8، ضمنی جدول 1–5)۔
منتخب ضروری تیلوں (A-diallyl disulfide; B-diallyl trisulfide; C-eugenol; D-methyl eugenol; E-limonene; F-Aromatic ceperone; G-α-pinene; H-cineole ؛ آر یوڈامول)۔
کل نو مرکبات (ڈائلل ڈسلفائیڈ، ڈائیلل ٹرائیسلفائیڈ، یوجینول، میتھائل یوجینول، کارون، لیمونین، یوکلپٹول، یوڈیسمول، α-پینین) کو موثر مرکبات کے طور پر شناخت کیا گیا تھا جو EO کے اہم اجزاء ہیں اور انفرادی طور پر ایڈیس ایجیپٹی کے خلاف بائیو ایسڈ کیے گئے تھے۔ مراحل.کمپاؤنڈ eudesmol میں 24 گھنٹے کی نمائش کے بعد LC50 ویلیو 2.25 ppm کے ساتھ سب سے زیادہ لاروا کش سرگرمی تھی۔ڈائیل ڈسلفائیڈ اور ڈائیل ٹرائی سلفائیڈ کے مرکبات میں بھی ممکنہ لاروا کش اثرات پائے گئے ہیں، جن کی اوسط ذیلی خوراک 10-20 پی پی ایم کی حد میں ہے۔63.35 ppm، 139.29 ppm کی LC50 اقدار کے ساتھ مرکبات eugenol، limonene اور eucalyptol کے لیے معتدل لاروا کش سرگرمی دوبارہ دیکھی گئی۔اور بالترتیب 24 گھنٹے بعد 181.33 پی پی ایم (ٹیبل 3)۔تاہم، میتھائل یوجینول اور کارون کی کوئی قابل ذکر لاروا کشی کی صلاحیت سب سے زیادہ خوراک پر بھی نہیں پائی گئی، اس لیے LC50 کی قدروں کا حساب نہیں لگایا گیا (ٹیبل 3)۔مصنوعی لاروا کش Temephos کا اوسط مہلک ارتکاز 0.43 ppm ایڈیس ایجپٹائی کے خلاف 24 گھنٹوں کے دوران تھا (ٹیبل 3، ضمنی جدول 6)۔
سات مرکبات (diallyl disulfide، diallyl trisulfide، eucalyptol، α-pinene، eudesmol، limonene اور carvone) کو موثر EO کے اہم مرکبات کے طور پر شناخت کیا گیا اور بالغ مصری ایڈیس مچھروں کے خلاف انفرادی طور پر تجربہ کیا گیا۔پروبٹ ریگریشن تجزیہ کے مطابق، Eudesmol میں 1.82 ppm کی LC50 قدر کے ساتھ سب سے زیادہ صلاحیت پائی گئی، اس کے بعد Eucalyptol کی LC50 ویلیو 17.60 ppm کے ساتھ 24 گھنٹے کی نمائش کے وقت ہے۔ٹیسٹ کیے گئے بقیہ پانچ مرکبات 140.79 سے 737.01 پی پی ایم (ٹیبل 3) کے درمیان LC50 والے بالغوں کے لیے اعتدال سے نقصان دہ تھے۔مصنوعی آرگنفاسفورس ملاتھیون یوڈیسمول سے کم طاقتور اور دیگر چھ مرکبات سے زیادہ تھا، جس کی LC50 ویلیو 24 گھنٹے کی نمائش کی مدت میں 5.44 پی پی ایم تھی (ٹیبل 3، ضمنی جدول 6)۔
سات قوی لیڈ مرکبات اور آرگن فاسفورس ٹیمفوسیٹ کو ان کی LC50 خوراکوں کے بائنری امتزاج کو 1:1 کے تناسب میں بنانے کے لیے منتخب کیا گیا تھا۔ایڈیس ایجپٹی کے خلاف ان کی لاروا کشی کی افادیت کے لیے کل 28 بائنری امتزاج تیار کیے گئے اور ان کا تجربہ کیا گیا۔نو مجموعے ہم آہنگی کے پائے گئے، 14 مجموعے مخالف تھے، اور پانچ مجموعے لاروا کش نہیں تھے۔ہم آہنگی کے امتزاج میں، ڈائیل ڈسلفائیڈ اور ٹیمو فول کا امتزاج سب سے زیادہ مؤثر تھا، 24 گھنٹے کے بعد 100 فیصد اموات کا مشاہدہ کیا گیا (ٹیبل 4)۔اسی طرح، ڈائیل ڈسلفائیڈ کے ساتھ لیمونین اور تھائیمیٹفوس کے ساتھ یوجینول کے مرکب نے 98.3٪ (ٹیبل 5) کے مشاہدہ لاروا کی اموات کے ساتھ اچھی صلاحیت ظاہر کی۔بقیہ 4 مجموعے، یعنی eudesmol Plus eucalyptol، eudesmol Plus limonene، eucalyptol plus alpha-pinene، alpha-pinene plus temephos، نے بھی نمایاں طور پر لاروا کشی کی افادیت ظاہر کی، مشاہدہ شدہ اموات کی شرح 90% سے زیادہ ہے۔متوقع شرح اموات 60-75% کے قریب ہے۔(ٹیبل 4)۔تاہم، α-pinene یا eucalyptus کے ساتھ limonene کے امتزاج نے مخالف ردعمل ظاہر کیا۔اسی طرح، Temephos کے eugenol یا eucalyptus یا eudesmol یا diallyl trisulfide کے ساتھ مرکب مخالف اثرات پائے گئے ہیں۔اسی طرح، ڈائیل ڈسلفائیڈ اور ڈائیل ٹرائی سلفائیڈ کا امتزاج اور ان مرکبات میں سے کسی ایک کا eudesmol یا eugenol کے ساتھ ملاپ ان کے لاروا کش عمل میں مخالف ہے۔eugenol یا α-pinene کے ساتھ eudesmol کے امتزاج سے بھی دشمنی کی اطلاع ملی ہے۔
بالغوں کی تیزابی سرگرمی کے لیے جانچے گئے تمام 28 بائنری مرکبات میں سے، 7 امتزاج ہم آہنگی کے تھے، 6 کا کوئی اثر نہیں ہوا، اور 15 مخالف تھے۔یوکلپٹس کے ساتھ eudesmol اور carvone کے ساتھ limonene کے مرکب دوسرے synergistic مجموعوں کے مقابلے میں زیادہ موثر پائے گئے، شرح اموات بالترتیب 76% اور 100% کے 24 گھنٹے میں (ٹیبل 5)۔لیمونین اور ڈائیل ٹرائی سلفائیڈ کے علاوہ تمام مرکبات کے مرکبات کے ساتھ ملاتھیون کو ایک ہم آہنگی کا اثر دکھاتے ہوئے دیکھا گیا ہے۔دوسری طرف، diallyl disulfide اور diallyl trisulfide اور ان دونوں میں سے کسی ایک کے eucalyptus، یا eucalyptol، یا carvone، یا limonene کے ساتھ مخاصمت پائی گئی ہے۔اسی طرح، α-pinene کے eudesmol یا limonene کے ساتھ، eucalyptol کا carvone یا limonene کے ساتھ، اور limonene کے eudesmol یا malathion کے ساتھ مخالف لاروا کش اثرات ظاہر ہوئے۔باقی چھ مجموعوں کے لیے، متوقع اور مشاہدہ شدہ اموات (ٹیبل 5) کے درمیان کوئی خاص فرق نہیں تھا۔
ہم آہنگی کے اثرات اور ذیلی خوراکوں کی بنیاد پر، ایڈیس ایجپٹی مچھروں کی ایک بڑی تعداد کے خلاف ان کے لاروا زہریلے پن کو بالآخر منتخب کیا گیا اور مزید جانچ کی گئی۔نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ بائنری امتزاج eugenol-limonene، diallyl disulfide-limonene اور diallyl disulfide-timephos کا استعمال کرتے ہوئے مشاہدہ لاروا کی اموات 100% تھی، جبکہ لاروا کی متوقع اموات بالترتیب 76.48%، 72.16% اور 63.4% (T,63%) تھی۔.لیمونین اور یوڈیسمول کا امتزاج نسبتاً کم موثر تھا، 24 گھنٹے کی نمائش کی مدت (ٹیبل 6) کے دوران لاروا کی شرح اموات 88 فیصد دیکھی گئی۔خلاصہ طور پر، چار منتخب بائنری امتزاج نے ایڈیس ایجپٹی کے خلاف ہم آہنگی کے لاروا کش اثرات کا بھی مظاہرہ کیا جب بڑے پیمانے پر لاگو کیا گیا (ٹیبل 6)۔
بالغ ایڈیس ایجپٹی کی بڑی آبادی کو کنٹرول کرنے کے لیے ایڈٹوکائیڈل بائیوسے کے لیے تین ہم آہنگی کے امتزاج کا انتخاب کیا گیا تھا۔بڑے حشرات کی کالونیوں پر ٹیسٹ کرنے کے لیے مجموعوں کو منتخب کرنے کے لیے، ہم نے سب سے پہلے دو بہترین ہم آہنگی والے ٹیرپین کے امتزاج پر توجہ مرکوز کی، یعنی کارون پلس لیمونین اور یوکلپٹول پلس یوڈیسمول۔دوم، مصنوعی آرگن فاسفیٹ میلاتھیون اور ٹیرپینائڈز کے امتزاج سے بہترین ہم آہنگی کا مجموعہ منتخب کیا گیا۔ہم سمجھتے ہیں کہ سب سے زیادہ مشاہدہ شدہ اموات اور امیدوار اجزاء کی بہت کم LC50 قدروں کی وجہ سے کیڑوں کی بڑی کالونیوں پر جانچ کے لیے ملاتھیون اور یوڈیسمول کا امتزاج بہترین امتزاج ہے۔ملاتھیون α-pinene، diallyl disulfide، eucalyptus، carvone اور eudesmol کے ساتھ مل کر ہم آہنگی کی نمائش کرتا ہے۔لیکن اگر ہم LC50 قدروں کو دیکھیں تو Eudesmol کی سب سے کم قیمت (2.25 ppm) ہے۔میلاتھیون، α-pinene، diallyl disulfide، eucalyptol اور carvone کی LC50 قدریں 5.4، 716.55، 166.02، 17.6 اور 140.79 ppm تھیں۔بالترتیبیہ اقدار اس بات کی نشاندہی کرتی ہیں کہ ملاتھیون اور یوڈیسمول کا مجموعہ خوراک کے لحاظ سے بہترین امتزاج ہے۔نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ کاروون پلس لیمونین اور یوڈیسمول پلس ملاتھیون کے مجموعوں میں 100٪ مشاہدہ شدہ اموات کے مقابلے میں 61٪ سے 65٪ کی متوقع اموات تھیں۔ایک اور مجموعہ، eudesmol plus eucalyptol، نے 24 گھنٹے کی نمائش کے بعد اموات کی شرح 78.66% ظاہر کی، اس کے مقابلے میں متوقع شرح اموات 60% تھی۔تینوں منتخب کردہ مجموعوں نے ہم آہنگی کے اثرات کا مظاہرہ کیا یہاں تک کہ جب بالغ ایڈیس ایجپٹی (ٹیبل 6) کے خلاف بڑے پیمانے پر لاگو کیا جائے۔
اس مطالعہ میں، منتخب پودوں کے EOs جیسے Mp, As, Os, Em اور Cl نے ایڈیس ایجپٹی کے لاروا اور بالغ مراحل پر امید افزا مہلک اثرات دکھائے۔Mp EO میں LC50 ویلیو 0.42 ppm کے ساتھ سب سے زیادہ لاروا کشی کی سرگرمی تھی، اس کے بعد As, Os اور Em EOs کی LC50 ویلیو 24 گھنٹے کے بعد 50 ppm سے کم تھی۔یہ نتائج مچھروں اور دیگر ڈپٹرس مکھیوں کے پچھلے مطالعات سے مطابقت رکھتے ہیں 10,11,12,13,14۔اگرچہ Cl کی لاروا کشی کی طاقت دیگر ضروری تیلوں سے کم ہے، 24 گھنٹوں کے بعد LC50 کی قیمت 163.65 ppm کے ساتھ، اس کی بالغ صلاحیت 24 گھنٹے کے بعد LC50 کی 23.37 ppm کے ساتھ سب سے زیادہ ہے۔Mp, As اور Em EOs نے بھی LC50 قدروں کے ساتھ 24 گھنٹے کی نمائش میں 100–120 ppm کی حد میں الرجی کی اچھی صلاحیت ظاہر کی، لیکن یہ ان کی لاروا کشی کی افادیت سے نسبتاً کم تھیں۔دوسری طرف، EO Os نے سب سے زیادہ علاج کی خوراک پر بھی نہ ہونے کے برابر الرجک اثر کا مظاہرہ کیا۔اس طرح، نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ پودوں میں ایتھیلین آکسائیڈ کی زہریلا پن مچھروں کی نشوونما کے مرحلے کے لحاظ سے مختلف ہو سکتا ہے۔یہ کیڑے کے جسم میں EOs کے داخل ہونے کی شرح، مخصوص ہدف کے خامروں کے ساتھ ان کے تعامل، اور ہر ترقیاتی مرحلے میں مچھر کی سم ربائی کی صلاحیت پر بھی منحصر ہے۔مطالعہ کی ایک بڑی تعداد سے پتہ چلتا ہے کہ بنیادی جزو مرکب ایتھیلین آکسائڈ کی حیاتیاتی سرگرمی میں ایک اہم عنصر ہے، کیونکہ یہ کل مرکبات 3,12,17,18 کی اکثریت کا حصہ ہے۔لہذا، ہم نے ہر EO میں دو اہم مرکبات پر غور کیا۔GC-MS کے نتائج کی بنیاد پر، ڈائیل ڈسلفائیڈ اور ڈائلائل ٹرائی سلفائیڈ کو EO As کے بڑے مرکبات کے طور پر شناخت کیا گیا، جو کہ پچھلی رپورٹس 19,20,21 سے مطابقت رکھتا ہے۔اگرچہ پچھلی رپورٹس نے اشارہ کیا تھا کہ مینتھول اس کے اہم مرکبات میں سے ایک تھا، کارون اور لیمونین کو دوبارہ Mp EO22,23 کے اہم مرکبات کے طور پر شناخت کیا گیا۔Os EO کے کمپوزیشن پروفائل سے پتہ چلتا ہے کہ eugenol اور methyl eugenol اہم مرکبات ہیں، جو پہلے کے محققین کے نتائج 16,24 سے مماثل ہیں۔Eucalyptol اور eucalyptol کو Em پتی کے تیل میں موجود اہم مرکبات کے طور پر رپورٹ کیا گیا ہے، جو کہ کچھ محققین 25,26 کے نتائج سے مطابقت رکھتا ہے لیکن Olalade et al.27 کے نتائج کے برعکس ہے۔melaleuca ضروری تیل میں cineole اور α-pinene کا غلبہ دیکھا گیا تھا، جو پچھلے مطالعات سے ملتا جلتا ہے 28,29۔مختلف مقامات پر ایک ہی پودوں کی انواع سے نکالے گئے ضروری تیلوں کی ساخت اور ارتکاز میں انٹراسپیسیفک فرق کی اطلاع دی گئی ہے اور اس تحقیق میں بھی دیکھا گیا ہے، جو پودوں کی جغرافیائی نشوونما کے حالات، کٹائی کے وقت، ترقی کے مرحلے، یا پودوں کی عمر سے متاثر ہوتے ہیں۔کیمو ٹائپس وغیرہ کی ظاہری شکل 22,30,31,32۔اس کے بعد کلیدی شناخت شدہ مرکبات خریدے گئے اور ان کے لاروا کش اثرات اور بالغ ایڈیس ایجپٹی مچھروں پر اثرات کے لیے تجربہ کیا گیا۔نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ڈائیل ڈسلفائڈ کی لاروا کش سرگرمی خام EO As کے مقابلے کے قابل تھی۔لیکن ڈائیل ٹرائسلفائیڈ کی سرگرمی EO As سے زیادہ ہے۔یہ نتائج کمبارس وغیرہ کے حاصل کردہ نتائج سے ملتے جلتے ہیں۔Culex فلپائن پر 33۔تاہم، ان دو مرکبات نے ہدف والے مچھروں کے خلاف اچھی خود کشی کی سرگرمی نہیں دکھائی، جو Tenebrio molitor پر Plata-Rueda et al 34 کے نتائج سے مطابقت رکھتی ہے۔Os EO ایڈیس ایجپٹائی کے لاروا مرحلے کے خلاف موثر ہے، لیکن بالغ مرحلے کے خلاف نہیں۔یہ قائم کیا گیا ہے کہ بنیادی انفرادی مرکبات کی لاروا کش سرگرمی خام Os EO سے کم ہے۔یہ خام ایتھیلین آکسائڈ میں دوسرے مرکبات اور ان کے تعامل کے لئے ایک کردار کا مطلب ہے۔اکیلے میتھائل یوجینول میں نہ ہونے کے برابر سرگرمی ہوتی ہے، جب کہ اکیلے یوجینول میں اعتدال پسند لاروا کش سرگرمی ہوتی ہے۔یہ نتیجہ ایک طرف تو 35,36 کی تصدیق کرتا ہے اور دوسری طرف اس سے پہلے کے محققین کے 37,38 کے نتائج سے متصادم ہے۔eugenol اور methyleugenol کے فنکشنل گروپس میں فرق کے نتیجے میں ایک ہی ہدف والے کیڑے میں مختلف زہریلے اثرات مرتب ہو سکتے ہیں۔لیمونین میں اعتدال پسند لاروا کشی کی سرگرمی پائی گئی، جبکہ کارون کا اثر غیر معمولی تھا۔اسی طرح، بالغ کیڑوں کے لیے لیمونین کی نسبتاً کم زہریلا اور کارون کی زیادہ زہریلا پن کچھ پچھلے مطالعات کے نتائج کی تائید کرتے ہیں40 لیکن دوسروں سے متصادم ہیں۔انٹرا سائکلک اور ایکسو سائکلک دونوں پوزیشنوں پر ڈبل بانڈز کی موجودگی ان مرکبات کے فوائد کو لاروا سائیڈز 3,41 کے طور پر بڑھا سکتی ہے، جبکہ کارون، جو کہ غیر سیر شدہ الفا اور بیٹا کاربن کے ساتھ ایک کیٹون ہے، بالغوں میں زہریلے پن کی زیادہ صلاحیت کا مظاہرہ کر سکتا ہے۔تاہم، لیمونین اور کارون کی انفرادی خصوصیات کل EO Mp (ٹیبل 1، ٹیبل 3) سے بہت کم ہیں۔ٹیسٹ کیے گئے terpenoids میں سے، eudesmol میں 2.5 ppm سے کم LC50 ویلیو کے ساتھ سب سے بڑی لاروا کش اور بالغ سرگرمی پائی گئی، جو اسے ایڈیس مچھروں کے کنٹرول کے لیے ایک امید افزا مرکب بناتی ہے۔اس کی کارکردگی پورے EO Em سے بہتر ہے، حالانکہ یہ Cheng et al.40 کے نتائج کے مطابق نہیں ہے۔Eudesmol دو isoprene یونٹوں کے ساتھ ایک sesquiterpene ہے جو کہ eucalyptus جیسے oxygenated monoterpenes سے کم اتار چڑھاؤ کا حامل ہے اور اس لیے اس میں کیڑے مار دوا کے طور پر زیادہ صلاحیت ہے۔Eucalyptol خود larvicidal سرگرمی سے زیادہ بالغ ہے، اور اس سے پہلے کے مطالعے کے نتائج 37,43,44 کی تائید اور تردید کرتے ہیں۔اکیلے سرگرمی تقریبا پورے EO Cl کے مقابلے میں ہے.ایک اور بائیسکلک مونوٹرپین، α-پینین، ایڈیس ایجپٹائی پر لاروا کشی اثر سے کم اثر رکھتا ہے، جو مکمل EO Cl کے اثر کے برعکس ہے۔terpenoids کی مجموعی کیڑے مار سرگرمی ان کی لپوفیلیسیٹی، اتار چڑھاؤ، کاربن برانچنگ، پروجیکشن ایریا، سطح کا رقبہ، فنکشنل گروپس اور ان کی پوزیشن 45,46 سے متاثر ہوتی ہے۔یہ مرکبات خلیوں کے جمع ہونے کو تباہ کرنے، سانس کی سرگرمیوں کو روکنے، اعصابی تحریکوں کی ترسیل میں رکاوٹ ڈال کر کام کر سکتے ہیں، وغیرہ۔ Utala48.مصنوعی آرگنفاسفورس ملاتھیون کی بالغ سرگرمی 5.44 پی پی ایم پر رپورٹ کی گئی۔اگرچہ ان دو آرگن فاسفیٹس نے ایڈیس ایجپٹائی کے لیبارٹری تناؤ کے خلاف سازگار ردعمل ظاہر کیا ہے، لیکن دنیا کے مختلف حصوں میں ان مرکبات کے خلاف مچھروں کی مزاحمت کی اطلاع ملی ہے۔تاہم، جڑی بوٹیوں کی دوائیوں کے خلاف مزاحمت کی ترقی کی کوئی ایسی ہی رپورٹ نہیں ملی ہے۔اس طرح، ویکٹر کنٹرول پروگراموں میں نباتات کو کیمیائی کیڑے مار ادویات کے ممکنہ متبادل کے طور پر سمجھا جاتا ہے۔
لاروا سائیڈل اثر کا تجربہ 28 بائنری امتزاج (1:1) پر کیا گیا جو قوی ٹیرپینائڈز اور تھیمیٹفوس کے ساتھ terpenoids سے تیار کیے گئے تھے، اور 9 امتزاج ہم آہنگی، 14 مخالف اور 5 مخالف پائے گئے۔کوئی اثر نہیں۔دوسری طرف، بالغ قوت بایواسے میں، 7 مجموعے مطابقت پذیر پائے گئے، 15 مجموعے مخالف تھے، اور 6 مجموعوں کا کوئی اثر نہیں ہوا۔بعض امتزاجات کے ہم آہنگی کا اثر پیدا کرنے کی وجہ امیدوار مرکبات مختلف اہم راستوں میں بیک وقت تعامل کرتے ہیں، یا کسی خاص حیاتیاتی راستے کے مختلف کلیدی خامروں کی ترتیب وار روکنا ہو سکتی ہے۔ڈائلائل ڈسلفائیڈ، یوکلپٹس یا یوجینول کے ساتھ لیمونین کا امتزاج چھوٹے اور بڑے پیمانے پر استعمال کرنے والے دونوں میں ہم آہنگ پایا گیا (ٹیبل 6)، جب کہ یوکلپٹس یا α-پینین کے ساتھ اس کے امتزاج سے لاروا پر مخالفانہ اثرات پائے گئے۔اوسطاً، لیمونین ایک اچھا ہم آہنگی پیدا کرنے والا معلوم ہوتا ہے، ممکنہ طور پر میتھائل گروپس کی موجودگی، سٹریٹم کورنیئم میں اچھی دخول، اور عمل کا ایک مختلف طریقہ کار52,53 کی وجہ سے۔یہ پہلے بتایا گیا ہے کہ لیمونین کیڑوں کے کٹیکلز میں گھس کر زہریلے اثرات کا سبب بن سکتا ہے (رابطہ زہریلا)، نظام انہضام (اینٹی فیڈنٹ) کو متاثر کر سکتا ہے، یا نظام تنفس (فیومیگیشن سرگرمی) کو متاثر کر سکتا ہے، 54 جبکہ فینائلپروپینائڈز جیسے یوجینول میٹابولک انزائمز 55 کو متاثر کر سکتے ہیں۔ لہذا، عمل کے مختلف میکانزم کے ساتھ مرکبات کے امتزاج مرکب کے مجموعی مہلک اثر کو بڑھا سکتے ہیں۔یوکلپٹول کو ڈائیل ڈسلفائیڈ، یوکلپٹس یا α-پینین کے ساتھ ہم آہنگ پایا گیا تھا، لیکن دیگر مرکبات کے ساتھ دیگر مرکبات یا تو غیر لاروی یا مخالف تھے۔ابتدائی مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ eucalyptol میں acetylcholinesterase (AChE) کے ساتھ ساتھ اوکٹامین اور GABA ریسیپٹرز56 پر روکنے والی سرگرمی ہوتی ہے۔چونکہ سائکلک مونوٹرپینز، یوکلپٹول، یوجینول، وغیرہ کا ایک ہی طریقہ کار ہو سکتا ہے جیسا کہ ان کی نیوروٹوکسک سرگرمی، 57 اس طرح باہمی روک تھام کے ذریعے ان کے مشترکہ اثرات کو کم کر دیتا ہے۔اسی طرح، ڈائیل ڈسلفائڈ، α-پینین اور لیمونین کے ساتھ ٹیمفوس کا امتزاج ہم آہنگ پایا گیا، جو جڑی بوٹیوں کی مصنوعات اور مصنوعی آرگن فاسفیٹس کے درمیان ہم آہنگی کے اثر کی پچھلی رپورٹوں کی حمایت کرتا ہے۔
eudesmol اور eucalyptol کے امتزاج کا Aedes aegypti کے لاروا اور بالغ مراحل پر ایک ہم آہنگی کا اثر پایا گیا، ممکنہ طور پر ان کے مختلف کیمیائی ڈھانچے کی وجہ سے ان کی کارروائی کے مختلف طریقوں کی وجہ سے۔Eudesmol (ایک sesquiterpene) نظام تنفس 59 کو متاثر کر سکتا ہے اور eucalyptol (monoterpene) acetylcholinesterase 60 کو متاثر کر سکتا ہے۔دو یا دو سے زیادہ ٹارگٹ سائٹس پر اجزاء کی مشترکہ نمائش مرکب کے مجموعی مہلک اثر کو بڑھا سکتی ہے۔بالغ مادے کے بائیو آسیز میں، میلاتھیون کو کارون یا یوکلپٹول یا یوکلپٹول یا ڈائلائل ڈسلفائیڈ یا α-پینین کے ساتھ ہم آہنگ پایا گیا، جو اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ یہ لیمونین اور ڈی کے اضافے کے ساتھ ہم آہنگ ہے۔ٹیرپین مرکبات کے پورے پورٹ فولیو کے لیے اچھے synergistic allercide امیدواروں کے علاوہ، allyl trisulfide کے۔تھنگم اور کیتھیرسن 61 نے بھی جڑی بوٹیوں کے عرقوں کے ساتھ ملاتھیون کے ہم آہنگی کے اثرات کے اسی طرح کے نتائج کی اطلاع دی۔یہ ہم آہنگی کا ردعمل کیڑوں کو detoxifying انزائمز پر ملاتھیون اور فائٹو کیمیکلز کے مشترکہ زہریلے اثرات کی وجہ سے ہو سکتا ہے۔آرگنو فاسفیٹس جیسے میلاتھیون عام طور پر سائٹوکوم P450 ایسٹریسیس اور مونو آکسیجنیس 62,63,64 کو روک کر کام کرتے ہیں۔لہٰذا، میلاتھیون کو عمل کے ان میکانزم کے ساتھ اور ٹیرپینز کو کارروائی کے مختلف میکانزم کے ساتھ ملانا مچھروں پر مجموعی طور پر مہلک اثر کو بڑھا سکتا ہے۔
دوسری طرف، دشمنی اس بات کی نشاندہی کرتی ہے کہ منتخب مرکبات اکیلے ہر مرکب کے مقابلے میں کم فعال ہوتے ہیں۔کچھ مرکبات میں دشمنی کی وجہ یہ ہو سکتی ہے کہ ایک مرکب جذب، تقسیم، تحول، یا اخراج کی شرح کو تبدیل کر کے دوسرے مرکب کے رویے کو تبدیل کرتا ہے۔ابتدائی محققین نے اسے منشیات کے امتزاج میں دشمنی کی وجہ سمجھا۔مالیکیولز ممکنہ میکانزم 65. اسی طرح، دشمنی کی ممکنہ وجوہات کا تعلق اسی طرح کے عمل کے میکانزم، ایک ہی ریسیپٹر یا ہدف کی جگہ کے لیے جزو مرکبات کے مقابلے سے ہو سکتا ہے۔بعض صورتوں میں، ہدف پروٹین کی غیر مسابقتی روکنا بھی ہو سکتی ہے۔اس مطالعے میں، دو آرگنسلفر مرکبات، ڈائلائل ڈسلفائیڈ اور ڈائلائل ٹرائیسلفائیڈ، نے مخالف اثرات ظاہر کیے، ممکنہ طور پر ایک ہی ہدف کی جگہ کے لیے مسابقت کی وجہ سے۔اسی طرح، ان دو سلفر مرکبات نے مخالف اثرات دکھائے اور eudesmol اور α-pinene کے ساتھ مل کر کوئی اثر نہیں کیا۔Eudesmol اور alpha-pinene فطرت میں سائیکلک ہیں، جبکہ diallyl disulfide اور diallyl trisulfide فطرت میں aliphatic ہیں۔کیمیائی ساخت کی بنیاد پر، ان مرکبات کے امتزاج سے مجموعی طور پر مہلک سرگرمی میں اضافہ ہونا چاہیے کیونکہ ان کے ہدف کی جگہیں عام طور پر مختلف ہوتی ہیں 34,47، لیکن تجرباتی طور پر ہمیں دشمنی کا پتہ چلا، جو vivo میں کچھ نامعلوم جانداروں میں ان مرکبات کے کردار کی وجہ سے ہو سکتا ہے۔تعامل کے نتیجے میں نظام۔اسی طرح، cineole اور α-pinene کے امتزاج نے مخالفانہ ردعمل پیدا کیا، حالانکہ محققین نے پہلے اطلاع دی تھی کہ دونوں مرکبات کے عمل کے مختلف اہداف ہیں 47,60۔چونکہ دونوں مرکبات سائکلک مونوٹرپینز ہیں، اس لیے کچھ مشترکہ ٹارگٹ سائٹس ہو سکتی ہیں جو بائنڈنگ کے لیے مقابلہ کر سکتی ہیں اور مطالعہ کیے گئے امتزاج جوڑوں کی مجموعی زہریلا کو متاثر کر سکتی ہیں۔
LC50 اقدار اور مشاہدہ شدہ اموات کی بنیاد پر، دو بہترین synergistic terpene کے امتزاج کا انتخاب کیا گیا، یعنی carvone + limonene اور eucalyptol + eudesmol کے جوڑے، نیز terpenes کے ساتھ مصنوعی organophosphorus malathion۔ملاتھیون + یوڈیسمول مرکبات کے بہترین ہم آہنگی کا تجربہ بالغ کیڑے مار دوا کے بائیو ایسے میں کیا گیا۔کیڑوں کی بڑی کالونیوں کو نشانہ بنائیں تاکہ اس بات کی تصدیق کی جا سکے کہ آیا یہ مؤثر امتزاج نسبتاً بڑی نمائش والی جگہوں پر بڑی تعداد میں افراد کے خلاف کام کر سکتے ہیں۔یہ تمام امتزاج کیڑوں کے بڑے بھیڑوں کے خلاف ہم آہنگی کا اثر ظاہر کرتے ہیں۔اسی طرح کے نتائج ایڈیس ایجپٹی لاروا کی بڑی آبادی کے خلاف آزمائے گئے ایک بہترین ہم آہنگی لاروا کشی مرکب کے لیے حاصل کیے گئے۔اس طرح، یہ کہا جا سکتا ہے کہ پودوں کے EO مرکبات کا مؤثر synergistic larvicidal اور Adulticidal امتزاج موجودہ مصنوعی کیمیکلز کے خلاف ایک مضبوط امیدوار ہے اور اسے ایڈیس ایجپٹی آبادی کو کنٹرول کرنے کے لیے مزید استعمال کیا جا سکتا ہے۔اسی طرح، مچھروں کو دی جانے والی تھیمیٹفوس یا میلاتھیون کی خوراک کو کم کرنے کے لیے مصنوعی لاروا کشوں یا ٹیرپینز کے ساتھ ایڈلٹیسائڈز کے موثر امتزاج کا بھی استعمال کیا جا سکتا ہے۔یہ طاقتور ہم آہنگی کے مجموعے ایڈیس مچھروں میں منشیات کے خلاف مزاحمت کے ارتقاء پر مستقبل کے مطالعے کے لیے حل فراہم کر سکتے ہیں۔
ایڈیس ایجپٹی کے انڈے ریجنل میڈیکل ریسرچ سنٹر، ڈبرو گڑھ، انڈین کونسل آف میڈیکل ریسرچ سے اکٹھے کیے گئے اور گوہاٹی یونیورسٹی کے شعبہ زولوجی میں کنٹرول درجہ حرارت (28 ± 1 ° C) اور نمی (85 ± 5%) میں رکھا گیا۔ مندرجہ ذیل شرائط: اریولی کو بیان کیا گیا تھا۔انڈوں سے نکلنے کے بعد، لاروا کو لاروا کھانا کھلایا گیا (کتے کے بسکٹ کا پاؤڈر اور خمیر 3:1 کے تناسب سے) اور بالغوں کو 10% گلوکوز کا محلول کھلایا گیا۔ظہور کے بعد تیسرے دن سے، بالغ مادہ مچھروں کو البینو چوہوں کا خون چوسنے کی اجازت تھی۔فلٹر پیپر کو ایک گلاس میں پانی میں بھگو کر انڈے دینے والے پنجرے میں رکھ دیں۔
منتخب پودوں کے نمونے یعنی یوکلپٹس کے پتے (Myrtaceae)، مقدس تلسی (Lamiaceae)، پودینہ (Lamiaceae)، melaleuca (Myrtaceae) اور allium bulbs (Amaryllidaceae)۔گوہاٹی سے جمع کیا گیا اور گوہاٹی یونیورسٹی کے شعبہ نباتیات نے شناخت کیا۔جمع کردہ پودوں کے نمونے (500 گرام) کو 6 گھنٹے تک کلیوینجر اپریٹس کا استعمال کرتے ہوئے ہائیڈروڈسٹلیشن کا نشانہ بنایا گیا۔نکالا گیا EO صاف شیشے کی شیشیوں میں جمع کیا گیا تھا اور مزید مطالعہ کے لیے 4 ° C پر محفوظ کیا گیا تھا۔
عالمی ادارہ صحت کے طریقہ کار 67 میں قدرے ترمیم شدہ معیاری طریقہ کار کا استعمال کرتے ہوئے لاروی زہریلے پن کا مطالعہ کیا گیا۔DMSO کو ایملسیفائر کے طور پر استعمال کریں۔ہر EO ارتکاز کا ابتدائی طور پر 100 اور 1000 ppm پر تجربہ کیا گیا، ہر نقل میں 20 لاروا کو بے نقاب کیا۔نتائج کی بنیاد پر، ارتکاز کی حد کا اطلاق کیا گیا اور 1 گھنٹے سے 6 گھنٹے (1 گھنٹے کے وقفے پر) اور علاج کے بعد 24 گھنٹے، 48 گھنٹے اور 72 گھنٹے میں اموات ریکارڈ کی گئیں۔سبلیتھل ارتکاز (LC50) کا تعین 24، 48 اور 72 گھنٹے کی نمائش کے بعد کیا گیا تھا۔ہر حراستی کو ایک منفی کنٹرول (صرف پانی) اور ایک مثبت کنٹرول (DMSO سے علاج شدہ پانی) کے ساتھ سہ رخی میں پرکھا گیا تھا۔اگر پیپشن ہوتا ہے اور کنٹرول گروپ کے 10٪ سے زیادہ لاروا مر جاتے ہیں، تو تجربہ دہرایا جاتا ہے۔اگر کنٹرول گروپ میں شرح اموات 5-10% کے درمیان ہے تو ایبٹ اصلاحی فارمولہ 68 استعمال کریں۔
Ramar et al کے ذریعہ بیان کردہ طریقہ۔69 کا استعمال ایڈیس ایجپٹی کے خلاف بالغ بائیو ایسے کے لیے ایسٹون کو سالوینٹ کے طور پر استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔ہر EO کا ابتدائی طور پر بالغ ایڈیس ایجپٹی مچھروں کے خلاف 100 اور 1000 پی پی ایم کے ارتکاز پر تجربہ کیا گیا۔ہر تیار شدہ محلول کے 2 ملی لیٹر واٹ مین نمبر پر لگائیں۔فلٹر پیپر کا 1 ٹکڑا (سائز 12 x 15 سینٹی میٹر) اور ایسٹون کو 10 منٹ تک بخارات بننے دیں۔فلٹر پیپر کو صرف 2 ملی لیٹر ایسیٹون کے ساتھ علاج کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ایسٹون کے بخارات بننے کے بعد، علاج شدہ فلٹر پیپر اور کنٹرول فلٹر پیپر کو ایک بیلناکار ٹیوب (10 سینٹی میٹر گہرائی) میں رکھا جاتا ہے۔دس 3- سے 4 دن پرانے بغیر خون کو کھانا کھلانے والے مچھروں کو ہر حراستی کے ٹرپلیکیٹس میں منتقل کیا گیا تھا۔ابتدائی ٹیسٹوں کے نتائج کی بنیاد پر، منتخب تیلوں کے مختلف ارتکاز کا تجربہ کیا گیا۔اموات مچھروں سے نکلنے کے 1 گھنٹے، 2 گھنٹے، 3 گھنٹے، 4 گھنٹے، 5 گھنٹے، 6 گھنٹے، 24 گھنٹے، 48 گھنٹے اور 72 گھنٹے بعد ریکارڈ کی گئیں۔24 گھنٹے، 48 گھنٹے اور 72 گھنٹے کے نمائش کے اوقات کے لیے LC50 اقدار کا حساب لگائیں۔اگر کنٹرول لاٹ کی شرح اموات 20% سے زیادہ ہے تو پورا ٹیسٹ دہرائیں۔اسی طرح، اگر کنٹرول گروپ میں شرح اموات 5% سے زیادہ ہے، تو ایبٹ کے فارمولے 68 کا استعمال کرتے ہوئے علاج شدہ نمونوں کے نتائج کو ایڈجسٹ کریں۔
گیس کرومیٹوگرافی (Agilent 7890A) اور ماس اسپیکٹومیٹری (Accu TOF GCv، Jeol) کو منتخب ضروری تیلوں کے اجزاء کے مرکبات کا تجزیہ کرنے کے لیے انجام دیا گیا۔جی سی ایک ایف آئی ڈی ڈیٹیکٹر اور کیپلیری کالم (HP5-MS) سے لیس تھا۔کیریئر گیس ہیلیم تھی، بہاؤ کی شرح 1 ملی لیٹر فی منٹ تھی۔GC پروگرام Allium sativum کو 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M اور Ocimum Sainttum کو 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280 پر سیٹ کرتا ہے، ٹکسال کے لیے 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280، یوکلپٹس کے لیے 20.60-1M-10-200-3M-30-280، اور سرخ کے لیے ایک ہزار تہوں کے لیے وہ ہیں۔ 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M۔
ہر EO کے بڑے مرکبات کی شناخت GC کرومیٹوگرام اور ماس اسپیکٹومیٹری کے نتائج (NIST 70 اسٹینڈرڈز ڈیٹا بیس کے حوالے سے) سے شمار کیے گئے رقبے کے فیصد کی بنیاد پر کی گئی تھی۔
ہر EO میں دو بڑے مرکبات کا انتخاب GC-MS کے نتائج کی بنیاد پر کیا گیا تھا اور مزید بائیو سیز کے لیے سگما-الڈرچ سے 98-99% پاکیزگی پر خریدا گیا تھا۔مرکبات کو ایڈیس ایجپٹی کے خلاف لاروا کشی اور بالغ افادیت کے لیے ٹیسٹ کیا گیا جیسا کہ اوپر بیان کیا گیا ہے۔سب سے زیادہ استعمال ہونے والی مصنوعی لاروا سائیڈز ٹیمفوسٹیٹ (سگما ایلڈرچ) اور بالغ دوائی ملاتھیون (سگما ایلڈرچ) کا تجزیہ کیا گیا تاکہ ان کی تاثیر کا موازنہ منتخب EO مرکبات کے ساتھ کیا جا سکے۔
منتخب ٹیرپین مرکبات اور ٹیرپین مرکبات کے علاوہ کمرشل آرگن فاسفیٹس (ٹائل فاس اور میلاتھیون) کے بائنری مرکب ہر امیدوار کمپاؤنڈ کی LC50 خوراک کو 1:1 کے تناسب میں ملا کر تیار کیے گئے تھے۔جیسا کہ اوپر بیان کیا گیا ہے تیار کردہ مرکبات کا ایڈیس ایجپٹی کے لاروا اور بالغ مراحل پر تجربہ کیا گیا۔ہر بایواسے ہر مرکب کے لئے سہ رخی میں اور ہر مرکب میں موجود انفرادی مرکبات کے لئے سہ رخی میں انجام دیا گیا تھا۔24 گھنٹے کے بعد ہدف کیڑوں کی موت ریکارڈ کی گئی۔درج ذیل فارمولے کا استعمال کرتے ہوئے بائنری مرکب کے لیے متوقع شرح اموات کا حساب لگائیں۔
جہاں E = بائنری امتزاج کے جواب میں ایڈیس ایجپٹی مچھروں کی متوقع شرح اموات، یعنی کنکشن (A + B)۔
ہر بائنری مرکب کے اثر کو ہم آہنگی، مخالف، یا کوئی اثر کے طور پر لیبل لگایا گیا تھا χ2 قدر کی بنیاد پر جو کہ Pavla52 کے بیان کردہ طریقہ سے شمار کیا گیا ہے۔درج ذیل فارمولے کا استعمال کرتے ہوئے ہر امتزاج کے لیے χ2 قدر کا حساب لگائیں۔
امتزاج کے اثر کو ہم آہنگی کے طور پر بیان کیا گیا تھا جب حساب شدہ χ2 قدر آزادی کی متعلقہ ڈگریوں (95% اعتماد کا وقفہ) کے لئے جدول کی قدر سے زیادہ تھی اور اگر مشاہدہ شدہ اموات متوقع اموات سے زیادہ پائی جاتی ہے۔اسی طرح، اگر کسی بھی امتزاج کے لیے حساب کی گئی χ2 قدر آزادی کی کچھ ڈگریوں کے ساتھ جدول کی قدر سے زیادہ ہے، لیکن مشاہدہ شدہ اموات متوقع اموات سے کم ہے، تو علاج کو مخالف سمجھا جاتا ہے۔اور اگر کسی بھی امتزاج میں χ2 کی حسابی قدر آزادی کی متعلقہ ڈگریوں میں جدول کی قدر سے کم ہے، تو مجموعہ کا کوئی اثر نہیں سمجھا جاتا ہے۔
کیڑوں کی ایک بڑی تعداد کے خلاف جانچ کے لیے تین سے چار ممکنہ طور پر ہم آہنگی کے مجموعے (100 لاروا اور 50 لاروا اور بالغ کیڑوں کی سرگرمی) کا انتخاب کیا گیا۔بالغ) اوپر کی طرح آگے بڑھیں۔مرکبات کے ساتھ، منتخب مرکب میں موجود انفرادی مرکبات کو بھی برابر تعداد میں ایڈیس ایجپٹی لاروا اور بالغوں پر آزمایا گیا۔امتزاج کا تناسب ایک امیدوار کمپاؤنڈ کا ایک حصہ LC50 خوراک اور دوسرے جزو مرکب کا حصہ LC50 خوراک ہے۔بالغوں کی سرگرمی کے بائیو ایسے میں، منتخب مرکبات کو سالوینٹ ایسٹون میں تحلیل کیا گیا اور 1300 سینٹی میٹر 3 بیلناکار پلاسٹک کنٹینر میں لپٹے ہوئے فلٹر پیپر پر لگایا گیا۔ایسٹون کو 10 منٹ کے لئے بخارات بنایا گیا اور بالغوں کو چھوڑ دیا گیا۔اسی طرح، larvicidal bioassay میں، LC50 امیدوار مرکبات کی خوراک کو پہلے DMSO کے مساوی مقدار میں تحلیل کیا گیا اور پھر 1300 cc پلاسٹک کے کنٹینرز میں ذخیرہ شدہ 1 لیٹر پانی میں ملایا گیا، اور لاروا چھوڑ دیا گیا۔
71 ریکارڈ شدہ اموات کے اعداد و شمار کا امکانی تجزیہ SPSS (ورژن 16) اور Minitab سافٹ ویئر کا استعمال کرتے ہوئے LC50 کی قدروں کا حساب لگانے کے لیے کیا گیا۔


پوسٹ ٹائم: جولائی 01-2024