فنگسائڈ کی تکمیل تنہائی میسن مکھیوں میں خالص توانائی حاصل کرنے اور مائکرو بایوم تنوع کو کم کرتی ہے۔

Nature.com پر جانے کا شکریہ۔براؤزر کا جو ورژن آپ استعمال کر رہے ہیں وہ محدود CSS سپورٹ رکھتا ہے۔بہترین نتائج کے لیے، ہم تجویز کرتے ہیں کہ آپ اپنے براؤزر کا نیا ورژن استعمال کریں (یا انٹرنیٹ ایکسپلورر میں مطابقت موڈ کو غیر فعال کریں)۔اس دوران، جاری تعاون کو یقینی بنانے کے لیے، ہم سائٹ کو اسٹائل یا جاوا اسکرپٹ کے بغیر ڈسپلے کر رہے ہیں۔
پھپھوند کش ادویات اکثر درختوں کے پھل پھولنے کے دوران استعمال کی جاتی ہیں اور ان سے کیڑے جرگوں کو خطرہ ہو سکتا ہے۔تاہم، اس بارے میں بہت کم معلوم ہے کہ غیر شہد کی مکھیوں کے جرگوں (مثلاً، تنہا شہد کی مکھیاں، اوسمیا کارنیفرنز) پھولوں کے دوران سیب پر عام طور پر استعمال ہونے والے رابطے اور نظامی فنگسائڈز کا جواب کیسے دیتے ہیں۔علم کا یہ فرق ریگولیٹری فیصلوں کو محدود کرتا ہے جو محفوظ ارتکاز اور فنگسائڈ اسپرے کے وقت کا تعین کرتے ہیں۔ہم نے دو کانٹیکٹ فنگسائڈز (کیپٹن اور مینکوزیب) اور چار انٹرلیئر/فائیٹو سسٹم فنگسائڈز (سیپرو سائکلائن، مائکلوبوٹانیل، پائروسٹروبن اور ٹرائفلوکسٹروبن) کے اثرات کا اندازہ کیا۔لاروا کے وزن میں اضافے، بقا، جنسی تناسب اور بیکٹیریل تنوع پر اثرات۔تشخیص ایک دائمی زبانی بایواسے کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا جس میں فیلڈ استعمال (1X)، نصف خوراک (0.5X) اور کم خوراک (0.1X) کے لیے فی الحال تجویز کردہ خوراک کی بنیاد پر تین خوراکوں میں جرگ کا علاج کیا گیا تھا۔مینکوزیب اور پائریٹیسولین کی تمام خوراکیں جسم کے وزن اور لاروا کی بقا کو نمایاں طور پر کم کرتی ہیں۔اس کے بعد ہم نے 16S جین کو مینکوزیب کے لاروا بیکٹیریا کی خصوصیت کے لیے ترتیب دیا، جو کہ سب سے زیادہ اموات کے لیے ذمہ دار فنگسائڈ ہے۔ہم نے پایا کہ مینکوزب سے علاج شدہ پولن پر کھلائے جانے والے لاروا میں بیکٹیریل تنوع اور کثرت میں نمایاں کمی واقع ہوئی ہے۔ہمارے لیبارٹری کے نتائج بتاتے ہیں کہ پھول آنے کے دوران ان میں سے کچھ فنگسائڈز کا چھڑکاؤ O. cornifrons کی صحت کے لیے خاص طور پر نقصان دہ ہے۔یہ معلومات پھلوں کے درختوں کے تحفظ کی مصنوعات کے پائیدار استعمال کے حوالے سے مستقبل کے انتظامی فیصلوں کے لیے متعلقہ ہے اور پولنیٹروں کی حفاظت کے لیے ریگولیٹری عمل کی بنیاد کے طور پر کام کرتی ہے۔
تنہا میسن مکھی اوسمیا کارنیفرنز (Hymenoptera: Megachilidae) کو 1970 کی دہائی کے آخر اور 1980 کی دہائی کے اوائل میں جاپان سے ریاستہائے متحدہ میں متعارف کرایا گیا تھا، اور اس کے بعد سے اس انواع نے منظم ماحولیاتی نظام میں ایک اہم جرگ کا کردار ادا کیا ہے۔اس شہد کی مکھی کی قدرتی آبادی جنگلی شہد کی مکھیوں کی تقریباً 50 اقسام کا حصہ ہے جو ان شہد کی مکھیوں کی تکمیل کرتی ہے جو ریاستہائے متحدہ میں بادام اور سیب کے باغات میں جرگ کرتی ہیں۔میسن کی مکھیوں کو بہت سے چیلنجز کا سامنا کرنا پڑتا ہے، بشمول رہائش گاہ کے ٹکڑے، پیتھوجینز، اور کیڑے مار ادویات 3,4۔کیڑے مار ادویات میں، فنگسائڈز توانائی کے حصول، چارہ 5 اور جسم کی کنڈیشنگ 6,7 کو کم کرتے ہیں۔اگرچہ حالیہ تحقیق سے پتہ چلتا ہے کہ میسن کی مکھیوں کی صحت کامنسل اور ایکٹو بیکٹک مائکروجنزموں سے براہ راست متاثر ہوتی ہے، 8,9 کیونکہ بیکٹیریا اور فنگس غذائیت اور مدافعتی ردعمل کو متاثر کر سکتے ہیں، میسن مکھیوں کے مائکروبیل تنوع پر فنگسائڈ کی نمائش کے اثرات ابھی شروع ہوئے ہیں۔ تعلیم حاصل کی۔
سیب کی خارش، کڑوی سڑ، بھوری سڑاند اور پاؤڈر پھپھوندی 10,11 جیسی بیماریوں کے علاج کے لیے پھول آنے سے پہلے اور اس کے دوران باغات میں مختلف اثرات (رابطہ اور نظامی) کی فنگسائڈز کا سپرے کیا جاتا ہے۔فنگسائڈس کو جرگوں کے لئے نقصان دہ سمجھا جاتا ہے، لہذا ان کی سفارش پھولوں کی مدت کے دوران باغبانوں کو کی جاتی ہے؛شہد کی مکھیوں کے ذریعہ ان فنگسائڈس کی نمائش اور ان کا استعمال نسبتا معروف ہے، کیونکہ یہ امریکی ماحولیاتی تحفظ ایجنسی اور بہت سی دیگر قومی ریگولیٹری ایجنسیوں کے ذریعہ کیڑے مار ادویات کے اندراج کے عمل کا حصہ ہے 12,13,14۔تاہم، غیر شہد کی مکھیوں پر فنگسائڈز کے اثرات کم معلوم ہیں کیونکہ ریاستہائے متحدہ میں مارکیٹنگ کی اجازت کے معاہدوں کے تحت ان کی ضرورت نہیں ہے۔اس کے علاوہ، عام طور پر واحد شہد کی مکھیوں کی جانچ کے لیے کوئی معیاری پروٹوکول نہیں ہیں 16,17، اور کالونیوں کو برقرار رکھنا جو شہد کی مکھیوں کو جانچ کے لیے مہیا کرتی ہیں، ایک چیلنجنگ ہے۔جنگلی شہد کی مکھیوں پر کیڑے مار ادویات کے اثرات کا مطالعہ کرنے کے لیے یورپ اور امریکہ میں مختلف منظم مکھیوں کے ٹرائلز تیزی سے کیے جا رہے ہیں، اور O. cornifrons19 کے لیے حال ہی میں معیاری پروٹوکول تیار کیے گئے ہیں۔
سینگ والی مکھیاں مونوسائٹس ہیں اور تجارتی طور پر کارپ کی فصلوں میں شہد کی مکھیوں کے اضافی یا متبادل کے طور پر استعمال ہوتی ہیں۔یہ شہد کی مکھیاں مارچ اور اپریل کے درمیان ابھرتی ہیں، مادہ سے تین سے چار دن پہلے غیر معمولی نر ابھرتے ہیں۔ملن کے بعد، مادہ نلی نما گھوںسلا گہا (قدرتی یا مصنوعی) 1,20 کے اندر بروڈ سیلز کی ایک سیریز فراہم کرنے کے لیے جرگ اور امرت کو فعال طور پر جمع کرتی ہے۔انڈے خلیوں کے اندر جرگ پر رکھے جاتے ہیں۔مادہ پھر اگلی سیل تیار کرنے سے پہلے مٹی کی دیوار بناتی ہے۔پہلا انسٹار لاروا chorion میں بند ہوتا ہے اور برانن کے سیالوں کو کھاتا ہے۔دوسرے سے پانچویں انسٹار (پریپوپا) تک، لاروا پولن 22 کو کھاتا ہے۔پولن کی سپلائی مکمل طور پر ختم ہوجانے کے بعد، لاروا کوکون، پیوپیٹ بناتے ہیں اور ایک ہی بروڈ چیمبر میں بالغوں کے طور پر ابھرتے ہیں، عام طور پر موسم گرما کے آخر میں 20,23۔بالغ اگلے موسم بہار میں ابھرتے ہیں.بالغوں کی بقا کا تعلق کھانے کی مقدار کی بنیاد پر خالص توانائی حاصل کرنے (وزن میں اضافے) سے ہے۔اس طرح، پولن کا غذائی معیار، نیز دیگر عوامل جیسے کہ موسم یا کیڑے مار ادویات کا استعمال، بقا اور صحت کے عامل ہیں۔
پھول آنے سے پہلے لگائے جانے والے کیڑے مار ادویات اور فنگسائڈز پودوں کی نالی کے اندر مختلف ڈگریوں تک منتقل ہونے کے قابل ہوتے ہیں، ٹرانسلیمینار سے لے کر (مثلاً، پتوں کی اوپری سطح سے نیچے کی سطح تک منتقل کرنے کے قابل، جیسے کچھ فنگسائڈز) 25 واقعی نظامی اثرات تک۔جو جڑوں سے تاج میں داخل ہو سکتا ہے، سیب کے پھولوں کے امرت میں داخل ہو سکتا ہے، جہاں وہ بالغ O. کارنیفرنز کو مار سکتے ہیں۔کچھ کیڑے مار ادویات بھی جرگ میں نکلتی ہیں، جو مکئی کے لاروا کی نشوونما کو متاثر کرتی ہیں اور ان کی موت کا سبب بنتی ہیں۔دیگر مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ کچھ فنگسائڈز متعلقہ پرجاتیوں O. lignaria28 کے گھونسلے کے رویے کو نمایاں طور پر تبدیل کر سکتے ہیں۔اس کے علاوہ، لیبارٹری اور فیلڈ اسٹڈیز جو کیڑے مار ادویات کی نمائش کے منظرناموں (بشمول فنگسائڈز) کی تقلید کرتے ہیں یہ ظاہر کرتے ہیں کہ کیڑے مار ادویات فزیالوجی 22 مورفولوجی 29 اور شہد کی مکھیوں اور کچھ تنہا مکھیوں کی بقا کو منفی طور پر متاثر کرتی ہیں۔پھولوں کے دوران کھلے پھولوں پر براہ راست لگائے جانے والے مختلف فنگسائڈل سپرے بالغوں کے ذریعے لاروا کی نشوونما کے لیے جمع کیے گئے جرگ کو آلودہ کر سکتے ہیں، جن کے اثرات کا مطالعہ کرنا باقی ہے۔
یہ تیزی سے تسلیم کیا جاتا ہے کہ لاروا کی نشوونما نظام انہضام کے جرگ اور مائکروبیل کمیونٹیز سے متاثر ہوتی ہے۔شہد کی مکھی مائکرو بایوم پیرامیٹر پر اثر انداز ہوتی ہے جیسے کہ باڈی ماس 31، میٹابولک تبدیلیاں22 اور پیتھوجینز کے لیے حساسیت۔پچھلے مطالعات میں تنہا شہد کی مکھیوں کے مائکرو بایوم پر ترقیاتی مرحلے، غذائی اجزاء اور ماحول کے اثر و رسوخ کا جائزہ لیا گیا ہے۔ان مطالعات سے لاروا اور پولن مائکرو بایوم 33 کی ساخت اور کثرت میں مماثلت کا انکشاف ہوا، نیز مکھیوں کی تنہا انواع میں سب سے زیادہ عام بیکٹیریل جنیرا سیوڈموناس اور ڈیلفیا۔تاہم، اگرچہ فنگسائڈس کا تعلق مکھیوں کی صحت کے تحفظ کے لیے حکمت عملیوں کے ساتھ کیا گیا ہے، لیکن براہ راست زبانی نمائش کے ذریعے لاروا مائکرو بائیوٹا پر فنگسائڈز کے اثرات غیر دریافت ہیں۔
اس مطالعہ نے ریاستہائے متحدہ میں درختوں کے پھلوں پر استعمال کے لیے رجسٹرڈ عام طور پر استعمال ہونے والی چھ فنگسائڈز کے حقیقی دنیا کی خوراکوں کے اثرات کا تجربہ کیا، جس میں آلودہ کھانے سے مکئی کے سینگ کیڑے کے کیڑے کے لاروا کو زبانی طور پر دی جانے والی رابطہ اور سیسٹیمیٹک فنگسائڈز شامل ہیں۔ہم نے پایا کہ رابطہ اور سیسٹیمیٹک فنگسائڈز نے شہد کی مکھیوں کے جسمانی وزن میں اضافہ اور شرح اموات کو کم کیا، مینکوزیب اور پائریتھیوپیڈ سے وابستہ انتہائی شدید اثرات کے ساتھ۔اس کے بعد ہم نے مینکوزیب سے علاج شدہ پولن ڈائیٹ پر کھلائے جانے والے لاروا کے مائکروبیل تنوع کا موازنہ کنٹرول ڈائیٹ پر کھلائے جانے والوں سے کیا۔ہم انٹیگریٹڈ پیسٹ اینڈ پولینیٹر مینجمنٹ (IPPM) 36 پروگراموں کے لیے موت کی شرح اور مضمرات کے تحت ممکنہ میکانزم پر تبادلہ خیال کرتے ہیں۔
کوکونز میں سردیوں میں گزرنے والے بالغ O. کارنیفرنز فروٹ ریسرچ سینٹر، بگلر ویل، PA سے حاصل کیے گئے تھے، اور −3 سے 2°C (±0.3°C) پر محفوظ کیے گئے تھے۔تجربے سے پہلے (مجموعی طور پر 600 کوکونز)۔مئی 2022 میں، 100 O. کارنیفرنز کوکونز کو روزانہ پلاسٹک کے کپوں میں منتقل کیا جاتا تھا (50 کوکونز فی کپ، DI 5 سینٹی میٹر × 15 سینٹی میٹر لمبا) اور کپوں کے اندر وائپس رکھے گئے تھے تاکہ کھلنے کو فروغ دیا جا سکے اور پتھری پر دباؤ کو کم کیا جا سکے۔ شہد کی مکھیاں 37کیڑوں کے پنجرے (30 × 30 × 30 سینٹی میٹر، بگ ڈورم میگا ویو سائنس کمپنی لمیٹڈ، تائیوان) میں کوکون پر مشتمل دو پلاسٹک کے کپوں کو 10 ملی لیٹر فیڈر کے ساتھ رکھیں جس میں 50٪ سوکروز محلول موجود ہے اور بندش اور ملاپ کو یقینی بنانے کے لیے چار دن تک اسٹور کریں۔23 ° C، رشتہ دار نمی 60%، فوٹو پیریڈ 10 l (کم شدت): 14 دن۔چوٹی سیب کے پھولوں کے دوران 100 مادہ اور نر ہر صبح چھ دن (100 فی دن) کے لیے دو مصنوعی گھونسلوں میں چھوڑے جاتے تھے (ٹریپ نیسٹ: چوڑائی 33.66 × اونچائی 30.48 × لمبائی 46.99 سینٹی میٹر؛ ضمنی شکل 1)۔پنسلوانیا اسٹیٹ آربوریٹم میں، چیری کے قریب (پرونس سیراسس 'ایوبانک' سویٹ چیری پائی™)، آڑو (پرونس پرسیکا 'مقابل')، پرنس پرسیکا 'PF 27A' Flamin Fury®)، ناشپاتی (Pyrus perifolia 'Olympic'، Pyrus persica' perifolia 'Sinko'، Pyrus perifolia 'Shinseiki'، coronaria Apple Tree (Malus coronaria) اور سیب کے درختوں کی متعدد اقسام (Malus coronaria, Malus), گھریلو سیب کا درخت 'Co-op 30′ Enterprise™, Malus Apple Tree' Co- Op 31′ Winecrisp™, begonia 'Freedom', Begonia 'Golden Delicious', Begonia 'Nova Spy')۔ہر نیلے رنگ کا پلاسٹک برڈ ہاؤس دو لکڑی کے ڈبوں کے اوپر فٹ بیٹھتا ہے۔ہر نیسٹ باکس میں 800 خالی کرافٹ پیپر ٹیوبیں ہوتی ہیں (سرپل کھلی، 0.8 سینٹی میٹر ID × 15 سینٹی میٹر L) (Jonesville Paper Tube Co., Michigan) مبہم سیلوفین ٹیوبوں میں ڈالی جاتی ہیں (0.7 OD دیکھیں پلاسٹک پلگ (T-1X پلگ) نیسٹنگ سائٹ فراہم کرتے ہیں۔ .
دونوں نیسٹ باکسز کا رخ مشرق کی طرف تھا اور ان پر سبز پلاسٹک باغ کی باڑ لگائی گئی تھی (ایوربلٹ ماڈل #889250EB12، افتتاحی سائز 5 × 5 سینٹی میٹر، 0.95 m × 100 m) تاکہ چوہا اور پرندوں کی رسائی کو روکا جا سکے اور نیسٹ باکس کی مٹی کے ساتھ مٹی کی سطح پر رکھا جائے۔ بکسنیسٹ باکس (ضمنی شکل 1a)۔کارن بورر کے انڈے روزانہ گھونسلوں سے 30 ٹیوبیں جمع کرکے لیبارٹری میں منتقل کیے جاتے تھے۔قینچی کا استعمال کرتے ہوئے، ٹیوب کے آخر میں ایک کٹ بنائیں، پھر بروڈ سیلز کو بے نقاب کرنے کے لیے سرپل ٹیوب کو الگ کریں۔انفرادی انڈوں اور ان کے جرگ کو مڑے ہوئے اسپاتولا (مائکرو سلائیڈ ٹول کٹ، بائیو کیپ پروڈکٹس انکارپوریشن، کیلیفورنیا) کا استعمال کرتے ہوئے ہٹا دیا گیا۔انڈے نم فلٹر پیپر پر لگائے گئے تھے اور ہمارے تجربات میں استعمال ہونے سے پہلے 2 گھنٹے کے لیے پیٹری ڈش میں رکھے گئے تھے (ضمنی شکل 1b-d)۔
لیبارٹری میں، ہم نے سیب کے کھلنے سے پہلے اور اس کے دوران تین ارتکاز (0.1X، 0.5X، اور 1X، جہاں 1X وہ نشان ہے جو فی 100 گیلن پانی/ایکڑ پر لاگو کیا گیا تھا) چھ فنگسائڈز کی زبانی زہریلا کا اندازہ کیا۔ ہائی فیلڈ ڈوز = ارتکاز میدان میں)۔، ٹیبل 1)۔ہر حراستی کو 16 بار دہرایا گیا (n = 16)۔دو رابطہ فنگسائڈز (ٹیبل ایس 1: مینکوزیب 2696.14 پی پی ایم اور کیپٹن 2875.88 پی پی ایم) اور چار سیسٹیمیٹک فنگسائڈز (ٹیبل ایس 1: پائریتھیوسٹروبن 250.14 پی پی ایم؛ ٹرائی فلوکسسٹروبن 110.06 پی پی ایم؛ مائکلوبیوٹانیل azole p.85 پی پی ایم) پھلوں، سبزیوں اور سجاوٹی فصلوں کی اہمیت .ہم نے گرائنڈر کا استعمال کرتے ہوئے پولن کو ہم آہنگ کیا، 0.20 جی کو کنویں (24 کنویں فالکن پلیٹ) میں منتقل کیا، اور 1 ملی میٹر گہرے کنوؤں کے ساتھ اہرام جرگ بنانے کے لیے 1 μL فنگسائڈ محلول شامل کیا اور ملایا جس میں انڈے رکھے گئے تھے۔منی اسپاتولا کا استعمال کرتے ہوئے رکھیں (ضمنی شکل 1c،d)۔فالکن پلیٹوں کو کمرے کے درجہ حرارت (25 ° C) اور 70% رشتہ دار نمی پر ذخیرہ کیا گیا تھا۔ہم نے ان کا موازنہ کنٹرول لاروا سے کیا جو خالص پانی کے ساتھ یکساں جرگ کی خوراک کو کھلایا جاتا ہے۔ہم نے شرح اموات کو ریکارڈ کیا اور لاروا کا وزن ہر دوسرے دن اس وقت تک ماپا جب تک کہ لاروا تجزیاتی توازن (فشر سائنٹیفک، درستگی = 0.0001 جی) کا استعمال کرتے ہوئے پری پیوپل عمر تک نہ پہنچ جائے۔آخر کار، 2.5 ماہ کے بعد کوکون کھول کر جنسی تناسب کا اندازہ لگایا گیا۔
ڈی این اے کو پورے O. کارنیفرون لاروا سے نکالا گیا تھا (n = 3 فی علاج کی حالت، مینکوزیب سے علاج شدہ اور غیر علاج شدہ پولن) اور ہم نے ان نمونوں پر مائکروبیل تنوع کا تجزیہ کیا، خاص طور پر اس وجہ سے کہ مینکوزیب میں لاروا میں سب سے زیادہ اموات دیکھی گئی۔MnZn وصول کرنا۔DNA کو بڑھایا گیا، DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA کٹ (Zymo Research, Irvine, CA) کا استعمال کرتے ہوئے صاف کیا گیا، اور v3 کٹ کا استعمال کرتے ہوئے Illumina® MiSeq™ پر ترتیب دیا گیا (600 سائیکل)۔بیکٹیریل 16S رائبوسومل RNA جینوں کی ٹارگٹڈ سیکوینسنگ Quick-16S™ NGS لائبریری پریپ کٹ (Zymo Research, Irvine, CA) کے ذریعے 16S rRNA جین کے V3-V4 ریجن کو نشانہ بنانے والے پرائمر کا استعمال کرتے ہوئے انجام دی گئی۔مزید برآں، 18S کی ترتیب کو 10% PhiX شمولیت کا استعمال کرتے ہوئے انجام دیا گیا، اور پرائمر جوڑی 18S001 اور NS4 کا استعمال کرتے ہوئے پروردن انجام دیا گیا۔
QIIME2 پائپ لائن (v2022.11.1) کا استعمال کرتے ہوئے پیئرڈ ریڈز 39 کو درآمد اور عمل کریں۔ان ریڈز کو تراش کر ضم کر دیا گیا تھا، اور QIIME2 (qiime dada2 noise pairing) 40 میں DADA2 پلگ ان کا استعمال کرتے ہوئے چیمریک ترتیب کو ہٹا دیا گیا تھا۔16S اور 18S کلاس اسائنمنٹس کو آبجیکٹ کلاسیفائر پلگ ان Classify-sklearn اور پہلے سے تربیت یافتہ آرٹفیکٹ silva-138-99-nb-classifier کا استعمال کرتے ہوئے انجام دیا گیا۔
تمام تجرباتی ڈیٹا کو نارملٹی (شاپیرو ولکس) اور مختلف حالتوں کی یکسانیت (لیون کا ٹیسٹ) کے لیے چیک کیا گیا۔چونکہ ڈیٹا سیٹ پیرامیٹرک تجزیہ کے مفروضوں پر پورا نہیں اترتا تھا اور تبدیلی بقایا کو معیاری بنانے میں ناکام رہی تھی، اس لیے ہم نے دو عوامل [وقت (تین فیز 2، 5 اور 8 دن) کے ساتھ ایک نان پیرامیٹرک دو طرفہ انووا (کرسکل والس) انجام دیا۔ ٹائم پوائنٹس) اور فنگسائڈ] لاروا کے تازہ وزن پر علاج کے اثر کا اندازہ کرنے کے لیے، پھر ولکوکسن ٹیسٹ کا استعمال کرتے ہوئے پوسٹ ہاک نان پیرامیٹرک جوڑے کے لحاظ سے موازنہ کیا گیا۔ہم نے پوسن ڈسٹری بیوشن کے ساتھ ایک عمومی لکیری ماڈل (GLM) کا استعمال کیا تاکہ فنگسائڈز کے تین فنگسائڈز کے ارتکاز 41,42 میں بقا پر اثرات کا موازنہ کیا جا سکے۔امتیازی کثرت کے تجزیے کے لیے، ایمپلیکن سیکوینس ویریئنٹس (ASVs) کی تعداد جینس کی سطح پر ختم ہو گئی تھی۔16S (جینس لیول) اور 18S رشتہ دار کثرت کا استعمال کرنے والے گروپوں کے درمیان تفریق کی کثرت کا موازنہ بیٹا زیرو فلیٹڈ (BEZI) فیملی ڈسٹری بیوشن کے ساتھ پوزیشن، اسکیل اور شکل (GAMLSS) کے لیے ایک عمومی اضافی ماڈل کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا، جو میکرو پر تیار کیے گئے تھے۔ .Microbiome R43 (v1.1) میں۔1)۔تفریق تجزیہ سے پہلے مائٹوکونڈریل اور کلوروپلاسٹ پرجاتیوں کو ہٹا دیں۔18S کی مختلف درجہ بندی کی سطحوں کی وجہ سے، ہر ٹیکسن کی صرف نچلی سطح کو تفریق کے تجزیوں کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔تمام شماریاتی تجزیے R (v. 3.4.3., CRAN پروجیکٹ) (ٹیم 2013) کا استعمال کرتے ہوئے کیے گئے تھے۔
مینکوزیب، پائریتھیوسٹروبن، اور ٹرائفلوکسٹروبن کی نمائش نے O. کارنیفرنز (تصویر 1) میں جسمانی وزن میں نمایاں کمی کی۔یہ اثرات ان تینوں خوراکوں کے لیے مستقل طور پر دیکھے گئے جن کا اندازہ لگایا گیا تھا (تصویر 1a–c)۔Cyclostrobin اور myclobutanil نے لاروا کے وزن میں نمایاں کمی نہیں کی۔
اسٹیم بورر لاروا کا اوسط تازہ وزن چار غذائی علاج کے تحت تین ٹائم پوائنٹس پر ماپا جاتا ہے (یکساں پولن فیڈ + فنگسائڈ: کنٹرول، 0.1X، 0.5X اور 1X خوراکیں)۔(a) کم خوراک (0.1X): پہلی بار پوائنٹ (دن 1): χ2: 30.99، DF = 6؛P <0.0001، دوسری بار پوائنٹ (دن 5): 22.83، DF = 0.0009؛تیسری مرتبہ؛نقطہ (8 دن): χ2: 28.39، DF = 6؛(b) نصف خوراک (0.5X): پہلی بار پوائنٹ (دن 1): χ2: 35.67، DF = 6؛پی <0.0001، دوسری بار پوائنٹ (پہلا دن)۔χ2: 15.98, DF = 6;پی = 0.0090;تیسری بار پوائنٹ (8 دن) χ2: 16.47، DF = 6؛(c) سائٹ یا مکمل خوراک (1X): پہلی بار پوائنٹ (دن 1) χ2: 20.64، P = 6؛P = 0.0326، دوسری بار پوائنٹ (دن 5): χ2: 22.83، DF = 6؛پی = 0.0009;تیسری بار پوائنٹ (8 دن): χ2: 28.39، DF = 6؛تغیر کا غیر پیرامیٹرک تجزیہ۔سلاخیں جوڑے کے لحاظ سے موازنہ (α = 0.05) (n = 16) *P ≤ 0.05، **P ≤ 0.001، ***P ≤ 0.0001 کی اوسط ±SE کی نمائندگی کرتی ہیں۔
سب سے کم خوراک (0.1X) پر، لاروا کے جسمانی وزن میں ٹرائیفلوکسٹروبن کے ساتھ 60%، مینکوزیب کے ساتھ 49%، مائکلوبوٹانیل کے ساتھ 48%، اور پائریتھسٹروبن (تصویر 1a) کے ساتھ 46% کم ہوا۔آدھی فیلڈ خوراک (0.5X) کے سامنے آنے پر، مینکوزیب لاروا کے جسمانی وزن میں 86%، پائریتھیوسٹروبن میں 52% اور ٹرائفلوکسٹروبن میں 50% کی کمی واقع ہوئی (تصویر 1b)۔مینکوزیب کی پوری فیلڈ خوراک (1X) نے لاروا کے وزن میں 82%، پائریتھیوسٹروبن میں 70%، اور ٹرائفلوکسٹروبن، مائکلوبوٹانیل اور سانگارڈ میں تقریباً 30% (تصویر 1c) کی کمی کی۔
لاروا کو مینکوزب سے علاج شدہ پولن میں موت کی شرح سب سے زیادہ تھی، اس کے بعد پائریتھیوسٹروبن اور ٹرائفلوکسٹروبین۔مینکوزیب اور پائریٹیسولین کی بڑھتی ہوئی خوراک کے ساتھ اموات میں اضافہ ہوا (تصویر 2؛ جدول 2)۔تاہم، مکئی کے بورر کی اموات میں صرف تھوڑا سا اضافہ ہوا کیونکہ ٹرائفلوکسٹروبن کی تعداد میں اضافہ ہوا۔سائپروڈینیل اور کیپٹن نے کنٹرول علاج کے مقابلے میں اموات میں نمایاں اضافہ نہیں کیا۔
بورر فلائی لاروا کی اموات کا موازنہ پولن کے اخراج کے بعد کیا گیا جس کا انفرادی طور پر چھ مختلف فنگسائڈز سے علاج کیا گیا۔مینکوزیب اور پینٹوپیرامائڈ مکئی کے میگوٹس (GLM: χ = 29.45، DF = 20، P = 0.0059) (لائن، ڈھلوان = 0.29، P <0.001؛ ڈھلوان = 0.24، <0.001) کے لیے زیادہ حساس تھے۔
اوسطاً، تمام علاج میں، 39.05% مریض خواتین اور 60.95% مرد تھے۔کنٹرول کے علاج میں، خواتین کا تناسب کم خوراک (0.1X) اور آدھی خوراک (0.5X) دونوں مطالعات میں 40% تھا، اور فیلڈ-ڈوز (1X) مطالعات میں 30% تھا۔0.1X خوراک پر، مینکوزیب اور مائکلوبوٹانیل کے ساتھ علاج کیے گئے پولن سے کھلائے جانے والے لاروا میں سے، 33.33% بالغ خواتین، 22% بالغ خواتین، 44% بالغ لاروا خواتین، 44% بالغ لاروا خواتین تھے۔مادہ، 41% بالغ لاروا مادہ تھے، اور کنٹرول 31% تھے (تصویر 3a)۔0.5 گنا خوراک پر، مینکوزیب اور پائریتھیوسٹروبن گروپ میں 33% بالغ کیڑے مادہ تھے، 36% ٹرائیفلوکسٹروبن گروپ میں، 41% مائکلوبوٹانیل گروپ میں، اور 46% سائپروسٹروبن گروپ میں۔گروپ میں یہ تعداد 53 فیصد تھی۔کیپٹن گروپ میں اور 38% کنٹرول گروپ میں (تصویر 3b)۔1X خوراک پر، مینکوزیب گروپ کی 30% خواتین، 36% پائریتھیوسٹروبن گروپ، 44% ٹرائی فلوکسیسٹروبن گروپ، 38% مائکلوبوٹانیل گروپ، 50% کنٹرول گروپ خواتین تھیں – 38.5% (تصویر 3c) .
لاروا اسٹیج فنگسائڈ کی نمائش کے بعد خواتین اور نر بوررز کا فیصد۔(a) کم خوراک (0.1X)۔(b) نصف خوراک (0.5X)۔(c) فیلڈ خوراک یا مکمل خوراک (1X)۔
16S تسلسل کے تجزیے سے معلوم ہوا کہ بیکٹیریل گروپ مینکوزیب سے علاج شدہ پولن سے کھلائے جانے والے لاروا اور علاج نہ کیے جانے والے پولن (تصویر 4a) سے کھلائے جانے والے لاروا کے درمیان فرق ہے۔جرگ پر کھلائے جانے والے غیر علاج شدہ لاروا کا مائکروبیل انڈیکس مینکوزیب سے علاج شدہ پولن (تصویر 4b) پر کھلائے جانے والے لاروا سے زیادہ تھا۔اگرچہ گروپوں کے درمیان امیریت میں مشاہدہ کیا گیا فرق اعدادوشمار کے لحاظ سے اہم نہیں تھا، لیکن یہ غیر علاج شدہ جرگ (تصویر 4c) پر لاروا کو کھانا کھلانے کے مشاہدے سے نمایاں طور پر کم تھا۔نسبتا کثرت سے پتہ چلتا ہے کہ کنٹرول پولن پر کھلائے جانے والے لاروا کا مائکرو بائیوٹا مینکوزیب سے علاج شدہ لاروا (تصویر 5a) پر کھلائے جانے والے لاروا سے زیادہ متنوع تھا۔وضاحتی تجزیے سے کنٹرول اور مینکوزیب سے علاج شدہ نمونوں میں 28 نسلوں کی موجودگی کا انکشاف ہوا (تصویر 5b)۔c 18S کی ترتیب کا استعمال کرتے ہوئے تجزیہ سے کوئی خاص فرق سامنے نہیں آیا (ضمنی شکل 2)۔
16S کی ترتیب پر مبنی SAV پروفائلز کا موازنہ شینن کی دولت سے کیا گیا اور فیلم کی سطح پر بھرپوریت کا مشاہدہ کیا گیا۔(a) پرنسپل کوآرڈینیٹ تجزیہ (PCoA) غیر علاج شدہ پولن فیڈ یا کنٹرول (نیلے) اور مینکوزیب فیڈ لاروا (اورینج) میں مائکروبیل کمیونٹی کی مجموعی ساخت پر مبنی۔ہر ڈیٹا پوائنٹ ایک الگ نمونے کی نمائندگی کرتا ہے۔پی سی او اے کا حساب ملٹی ویریٹ ٹی ڈسٹری بیوشن کے برے کرٹس فاصلے کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔اوول 80% اعتماد کی سطح کی نمائندگی کرتے ہیں۔(b) باکس پلاٹ، خام شینن ویلتھ ڈیٹا (پوائنٹس) اور سی۔قابل مشاہدہ دولت۔باکس پلاٹ میڈین لائن، انٹرکوارٹائل رینج (IQR)، اور 1.5 × IQR (n = 3) کے لیے خانے دکھاتے ہیں۔
مینکوزیب سے علاج شدہ اور غیر علاج شدہ جرگ پر کھلائے جانے والے لاروا کی مائکروبیل کمیونٹیز کی تشکیل۔(a) لاروا میں مائکروبیل جینرا کی نسبتا کثرت پڑھتی ہے۔(b) شناخت شدہ مائکروبیل کمیونٹیز کا ہیٹ میپ۔ڈیلفیا (مشکلات کا تناسب (OR) = 0.67، P = 0.0030) اور Pseudomonas (OR = 0.3، P = 0.0074)، مائکروبیکٹیریم (OR = 0.75، P = 0.0617) (OR = 1.5، P = 0.0060)؛حرارت کے نقشے کی قطاریں ارتباط کی دوری اور اوسط کنیکٹوٹی کا استعمال کرتے ہوئے کلسٹر کی جاتی ہیں۔
ہمارے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ رابطہ (مینکوزیب) اور سیسٹیمیٹک (پائروسٹروبن اور ٹرائفلوکسٹروبن) فنگسائڈس کے ساتھ زبانی نمائش، جو پھول کے دوران بڑے پیمانے پر استعمال ہوتی ہے، وزن میں نمایاں طور پر کمی اور مکئی کے لاروا کی اموات میں اضافہ ہوتا ہے۔اس کے علاوہ، مینکوزیب نے پری پیوپل مرحلے کے دوران مائکرو بایوم کے تنوع اور بھرپوری کو نمایاں طور پر کم کیا۔Myclobutanil، ایک اور نظامی فنگسائڈ، تینوں خوراکوں پر لاروا کے جسمانی وزن میں نمایاں طور پر کمی کرتا ہے۔یہ اثر دوسرے (دن 5) اور تیسرے (دن 8) ٹائم پوائنٹس پر ظاہر ہوا۔اس کے برعکس، سائپروڈینیل اور کیپٹن نے کنٹرول گروپ کے مقابلے میں وزن میں اضافے یا بقا کو نمایاں طور پر کم نہیں کیا۔ہمارے علم کے مطابق، یہ کام مختلف فنگسائڈز کے فیلڈ ریٹ کے اثرات کا تعین کرنے کا پہلا کام ہے جو مکئی کی فصلوں کو براہ راست جرگ کی نمائش کے ذریعے محفوظ کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔
تمام فنگسائڈ علاج نے کنٹرول علاج کے مقابلے میں جسمانی وزن میں نمایاں کمی کی۔مانکوزیب نے لاروا کے جسمانی وزن میں اوسطاً 51% کی کمی کے ساتھ سب سے زیادہ اثر ڈالا، اس کے بعد پائریتھیوسٹروبن۔تاہم، دیگر مطالعات میں لاروا کے مراحل44 پر فنگسائڈس کی فیلڈ ڈوز کے منفی اثرات کی اطلاع نہیں دی گئی ہے۔اگرچہ ڈیتھیو کاربامیٹ بائیو سائیڈز کو کم شدید زہریلا دکھایا گیا ہے، لیکن ایتھیلین بِسڈیتھیو کاربامیٹس (ای بی ڈی سی ایس) جیسے مینکوزیب یوریا ایتھیلین سلفائیڈ میں کمی کر سکتے ہیں۔دوسرے جانوروں میں اس کے mutagenic اثرات کو دیکھتے ہوئے، یہ انحطاط کی مصنوعات مشاہدہ شدہ اثرات کے لیے ذمہ دار ہو سکتی ہے46,47۔پچھلے مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ ایتھیلین تھیوریا کی تشکیل بلند درجہ حرارت48، نمی کی سطح49 اور مصنوعات کے ذخیرہ کرنے کی لمبائی 50 جیسے عوامل سے متاثر ہوتی ہے۔بائیو سائیڈز کے لیے ذخیرہ کرنے کے مناسب حالات ان ضمنی اثرات کو کم کر سکتے ہیں۔اس کے علاوہ، یورپی فوڈ سیفٹی اتھارٹی نے پائریتھوپیڈ کے زہریلے ہونے پر تشویش کا اظہار کیا ہے، جو دوسرے جانوروں کے نظام انہضام کے لیے سرطان پیدا کرتا ہے۔
مینکوزیب، پائریتھیوسٹروبن، اور ٹرائی فلوکسیسٹروبن کی زبانی انتظامیہ کارن بورر لاروا کی اموات کو بڑھاتی ہے۔اس کے برعکس، myclobutanil، ciprocycline اور captan کا شرح اموات پر کوئی اثر نہیں ہوا۔یہ نتائج Ladurner et al.52 سے مختلف ہیں، جنہوں نے ظاہر کیا کہ کیپٹن نے بالغ O. lignaria اور Apis mellifera L. (Hymenoptera, Apisidae) کی بقا کو نمایاں طور پر کم کیا۔اس کے علاوہ، کیپٹن اور بوسکالڈ جیسی فنگسائڈز لاروا کی اموات کا سبب بنتی ہیں 52,53,54 یا کھانا کھلانے کے رویے کو تبدیل کرتی ہیں۔یہ تبدیلیاں، بدلے میں، پولن کے غذائیت کے معیار اور بالآخر لاروا مرحلے کی توانائی کے حصول کو متاثر کر سکتی ہیں۔کنٹرول گروپ میں دیکھی گئی اموات دیگر مطالعات 56,57 کے مطابق تھیں۔
ہمارے کام میں مشاہدہ کردہ مردانہ جنس کے تناسب کی وضاحت پھولوں کے دوران ناکافی ملاپ اور خراب موسمی حالات جیسے عوامل سے کی جا سکتی ہے، جیسا کہ پہلے وائسنس اور بوش نے O. کارنوٹا کے لیے تجویز کیا تھا۔اگرچہ ہمارے مطالعے میں خواتین اور مردوں کے پاس میٹنگ کے لیے چار دن تھے (ایک مدت جو عام طور پر کامیاب میٹنگ کے لیے کافی سمجھی جاتی ہے)، ہم نے تناؤ کو کم کرنے کے لیے جان بوجھ کر روشنی کی شدت کو کم کیا۔تاہم، یہ ترمیم غیر ارادی طور پر ملاوٹ کے عمل میں مداخلت کر سکتی ہے61۔اس کے علاوہ، شہد کی مکھیاں کئی دنوں تک منفی موسم کا تجربہ کرتی ہیں، بشمول بارش اور کم درجہ حرارت (<5°C)، جو کہ ملاوٹ کی کامیابی پر منفی اثر ڈال سکتا ہے4,23۔
اگرچہ ہمارا مطالعہ پورے لاروا مائکرو بایوم پر مرکوز ہے، ہمارے نتائج بیکٹیریل کمیونٹیز کے درمیان ممکنہ تعلقات کے بارے میں بصیرت فراہم کرتے ہیں جو شہد کی مکھیوں کی غذائیت اور فنگسائڈ کی نمائش کے لیے اہم ہو سکتے ہیں۔مثال کے طور پر، لاروا کو کھلایا گیا مینکوزیب سے علاج شدہ پولن نے غیر علاج شدہ پولن کے مقابلے میں مائکروبیل کمیونٹی کی ساخت اور کثرت کو نمایاں طور پر کم کر دیا تھا۔غیر علاج شدہ جرگ استعمال کرنے والے لاروا میں، بیکٹیریل گروپ پروٹو بیکٹیریا اور ایکٹینوبیکٹیریا غالب تھے اور بنیادی طور پر ایروبک یا فیکلٹیٹو ایروبک تھے۔ڈیلفٹ بیکٹیریا، عام طور پر تنہا مکھیوں کی پرجاتیوں سے منسلک ہوتے ہیں، ان میں اینٹی بائیوٹک سرگرمی ہوتی ہے، جو پیتھوجینز کے خلاف ممکنہ حفاظتی کردار کی نشاندہی کرتی ہے۔ایک اور جراثیم کی نسل، سیوڈموناس، لاروا میں غیر علاج شدہ جرگ کو کھلایا گیا تھا، لیکن مینکوزب سے علاج شدہ لاروا میں نمایاں طور پر کم ہو گیا تھا۔ہمارے نتائج پچھلے مطالعات کی حمایت کرتے ہیں جس میں Pseudomonas کی شناخت O. bicornis35 اور دیگر تنہا wasps34 میں سب سے زیادہ پائی جانے والی نسل میں سے ایک ہے۔اگرچہ O. cornifrons کی صحت میں Pseudomonas کے کردار کے تجرباتی شواہد کا مطالعہ نہیں کیا گیا ہے، لیکن یہ جراثیم بیٹل Paederus fuscipes میں حفاظتی ٹاکسن کی ترکیب کو فروغ دینے اور وٹرو 35, 65 میں ارجنائن میٹابولزم کو فروغ دینے کے لیے دکھایا گیا ہے۔ یہ مشاہدات بتاتے ہیں۔ O. cornifrons لاروا کی نشوونما کے دوران وائرل اور بیکٹیریل دفاع میں ممکنہ کردار۔مائکروبیکٹیریم ایک اور جینس ہے جس کی نشاندہی ہمارے مطالعے میں کی گئی ہے جس کے بارے میں بتایا گیا ہے کہ بھوک کی حالت میں سیاہ سپاہی فلائی لاروا زیادہ تعداد میں موجود ہے۔O. cornifrons لاروا میں، مائکروبیکٹیریا تناؤ کے حالات میں گٹ مائکرو بایوم کے توازن اور لچک میں حصہ ڈال سکتے ہیں۔مزید برآں، روڈوکوکس O. cornifrons لاروا میں پایا جاتا ہے اور اپنی detoxification کی صلاحیتوں کے لیے جانا جاتا ہے67۔یہ نسل A. florea کے گٹ میں بھی پائی جاتی ہے، لیکن بہت کم کثرت میں۔ہمارے نتائج متعدد مائکروبیل ٹیکسا میں متعدد جینیاتی تغیرات کی موجودگی کو ظاہر کرتے ہیں جو لاروا میں میٹابولک عمل کو تبدیل کرسکتے ہیں۔تاہم، O. cornifrons کے فنکشنل تنوع کی بہتر تفہیم کی ضرورت ہے۔
خلاصہ طور پر، نتائج بتاتے ہیں کہ مینکوزیب، پائریتھیوسٹروبن، اور ٹرائی فلوکسیسٹروبن نے جسمانی وزن میں کمی اور کارن بورر لاروا کی شرح اموات میں اضافہ کیا۔اگرچہ جرگوں پر فنگسائڈس کے اثرات کے بارے میں تشویش بڑھ رہی ہے، لیکن ان مرکبات کے بقایا میٹابولائٹس کے اثرات کو بہتر طور پر سمجھنے کی ضرورت ہے۔ان نتائج کو انٹیگریٹڈ پولنیٹر مینجمنٹ پروگراموں کی سفارشات میں شامل کیا جا سکتا ہے جو کاشتکاروں کو پھلوں کے درختوں کے پھول آنے سے پہلے اور اس کے دوران فنگسائڈز کا انتخاب کرکے اور استعمال کے وقت کو مختلف کرکے، یا کم نقصان دہ متبادل کے استعمال کی حوصلہ افزائی کرکے بعض فنگسائڈز کے استعمال سے بچنے میں مدد کرتے ہیں۔ سفارشات کی ترقی کے لئے اہم ہے.کیڑے مار ادویات کے استعمال پر، جیسے کہ موجودہ سپرے پروگراموں کو ایڈجسٹ کرنا اور فنگسائڈز کا انتخاب کرتے وقت سپرے کے وقت کو تبدیل کرنا یا کم خطرناک متبادل کے استعمال کو فروغ دینا۔جنس کے تناسب، کھانا کھلانے کے رویے، گٹ مائکرو بایوم، اور مکئی کے بورر کے وزن میں کمی اور شرح اموات پر فنگسائڈز کے منفی اثرات کے بارے میں مزید تحقیق کی ضرورت ہے۔
اعداد و شمار 1 اور 2 میں ماخذ ڈیٹا 1، 2 اور 3 کو فگ شیئر ڈیٹا ریپوزٹری DOI میں جمع کیا گیا ہے: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 اور https://doi.org/10.6084/m9۔figshare.24996233.موجودہ مطالعہ (تصویر 4، 5) میں تجزیہ کردہ ترتیب NCBI SRA ذخیرہ میں الحاق نمبر PRJNA1023565 کے تحت دستیاب ہیں۔
بوش، جے اور کیمپ، ڈبلیو پی ڈیولپمنٹ اور شہد کی مکھیوں کی پرجاتیوں کی زرعی فصلوں کے جرگ کے طور پر قیام: آسمیا نسل کی مثال۔(Hymenoptera: Megachilidae) اور پھل دار درخت۔بیل۔Ntomore.وسائل92، 3–16 (2002)۔
پارکر، ایم جی وغیرہ۔نیو یارک اور پنسلوانیا میں سیب کے کاشتکاروں میں پولنیشن کے طریقے اور متبادل جرگوں کے تصورات۔اپ ڈیٹ۔زراعت۔کھانے کے نظام.35، 1–14 (2020)۔
Koch I.، Lonsdorf EW، Artz DR، Pitts-Singer TL اور Rickets TH ایکولوجی اینڈ اکنامکس آف بادام پولنیشن کا استعمال کرتے ہوئے مقامی مکھیوں کا استعمال۔جے اکنامکس۔Ntomore.111، 16–25 (2018)۔
Lee, E., He, Y., اور Park, Y.-L.ٹریگوپن فینولوجی پر موسمیاتی تبدیلی کے اثرات: آبادی کے انتظام کے لئے مضمرات۔چڑھنا۔150، 305–317 (2018) کو تبدیل کریں۔
آرٹز، ڈی آر اور پِٹس سنگر، ​​دو منظم تنہا شہد کی مکھیوں کے گھونسلے کے رویے پر فنگسائڈ اور معاون سپرے کا TL اثرPloS One 10, e0135688 (2015)۔
Beauvais، S. et al.ایک کم زہریلا فصل فنگسائڈ (فینبوکونازول) نر تولیدی معیار کے سگنلز میں مداخلت کرتا ہے جس کے نتیجے میں جنگلی تنہا مکھیوں میں ملاوٹ کی کامیابی کم ہوتی ہے۔J. ایپس۔ماحولیات59، 1596–1607 (2022)۔
Sgolastra F. et al.Neonicotinoid کیڑے مار ادویات اور ergosterol biosynthesis شہد کی مکھیوں کی تین پرجاتیوں میں synergistic fungicide اموات کو دباتے ہیں۔کیڑوں پر قابو۔سائنس۔73، 1236–1243 (2017)۔
Kuhneman JG، Gillung J، Van Dyck MT، Fordyce RF.اور ڈینفورتھ بی این سولیٹری تتییا کا لاروا جرگ کے ذریعے فراہم کردہ بیکٹیریائی تنوع کو بدل دیتا ہے جو تنے میں گھونسلے والی مکھیوں اوسمیا کارنیفرنز (میگاچیلیڈی) کو فراہم کرتا ہے۔سامنےمائکروجنزم13، 1057626 (2023)۔
Dharampal PS، Danforth BN اور Steffan SA خمیر شدہ پولن میں ایکٹوسیمبیوٹک مائکروجنزم تنہا شہد کی مکھیوں کی نشوونما کے لیے اتنے ہی اہم ہیں جتنا کہ خود پولن۔ماحولیاتارتقاء12. e8788 (2022)۔
Kelderer M, Manici LM, Caputo F اور Thalheimer M. سیب کے باغات میں بین قطار پودے لگانا تاکہ دوبارہ اگانے والی بیماریوں کو کنٹرول کیا جا سکے: مائکروبیل اشارے پر مبنی ایک عملی تاثیر کا مطالعہ۔پودے کی مٹی 357، 381–393 (2012)۔
مارٹن PL، Kravchik T.، Khodadadi F.، Achimovich SG اور Peter KA بٹر روٹ آف ایپل ان دی مڈ اٹلانٹک یونائیٹڈ سٹیٹس: اسیسمنٹ آف کازیٹیو اسپیسز اور دی اثر آف ریجنل موسمی حالات اور کاشتکاری کی حساسیت۔فائٹو پیتھولوجی 111، 966–981 (2021)۔
کولن ایم جی، تھامسن ایل جے، کیرولن جے کے، اسٹاؤٹ جے کے۔اور اسٹینلے ڈی اے فنگسائڈس، جڑی بوٹیوں کی دوائیں اور شہد کی مکھیوں: موجودہ تحقیق اور طریقوں کا ایک منظم جائزہ۔PLOS One 14, e0225743 (2019)۔
Pilling, ED اور Jepson, PC Synergistic EBI Fungicides and pyrethroid insecticides on honey bees (Apis mellifera)۔سائنس کو کیڑوں.39، 293–297 (1993)۔
Mussen, EC, Lopez, JE and Peng, CY شہد کی مکھی کے لاروا Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae) کی نشوونما اور نشوونما پر منتخب فنگسائڈس کا اثر۔بدھ۔Ntomore.33، 1151-1154 (2004)۔
وین ڈائک، ایم.، مولن، ای.، وِک سٹیڈ، ڈی، اور میک آرٹ، ایس. درختوں کے باغات میں پولنیٹروں کے تحفظ کے لیے کیڑے مار دوا کے استعمال کے لیے فیصلہ کن گائیڈ (کارنیل یونیورسٹی، 2018)۔
Iwasaki, JM اور Hogendoorn, K. شہد کی مکھیوں کی غیر کیڑے مار دوائیوں کی نمائش: طریقوں کا جائزہ اور نتائج کی اطلاع۔زراعت۔ماحولیاتی نظامبدھ۔314، 107423 (2021)۔
Kopit AM، Klinger E، Cox-Foster DL، Ramirez RA.اور Pitts-Singer TL Osmia lignaria (Hymenoptera: Megachilidae) کے لاروا کی نشوونما پر سپلائی کی قسم اور کیڑے مار دوا کی نمائش کا اثر۔بدھ۔Ntomore.51، 240–251 (2022)۔
Kopit AM اور Pitts-Singer TL پاتھ ویز کیڑے مار دوا کی تنہائی میں خالی گھونسلے کی مکھیوں کے سامنے۔بدھ۔Ntomore.47، 499–510 (2018)۔
پین، این ٹی وغیرہ۔بالغ جاپانی باغی مکھیوں (اسمیا کارنیفرنز) میں کیڑے مار زہریلے پن کا اندازہ لگانے کے لیے ایک نیا انجکشن بائیوسے پروٹوکول۔سائنس۔رپورٹس 10، 9517 (2020)۔